1997 Fiscal Year Annual Research Report

抗腫瘍免疫におけるT細胞活性化の制御

Research Project

Project/Area Number	09256202
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	斉藤隆千葉大学, 医学部, 教授 (50205655)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	荒瀬尚千葉大学, 医学部, 助手 (10261900) 大野博司千葉大学, 医学部, 助教授 (50233226)
Keywords	抑制性シグナル / CTLA-4 / アダプター複合体 / μ2 / SHP-2 / Co-stimulation / チロシンリン酸化 / internalization
Research Abstract	T細胞の活性化は、TCRを介する抗原認識シグナルと共にCo-stimulationシグナルによってポジティブにネガティブに制御されている。CD28を介してポジティブなCo-stimulationが行われるのに対して、CTLA-4を介するシグナルは活性化を抑制する。CTLA-4はCD28と同一のリガンド(CD80,CD86)と高親和性で結合し、CD28が常に細胞表面に発現しているのに対して、CTLA-4はT細胞活性化に伴って一過性にのみ発現する。抗CTLA-4抗体を投与することによって腫瘍の生着が抑制されることから、CTLA-4の発現調節と抑制性シグナルの制御は抗腫瘍免疫の活性化に重要である。我々は、CTLA-4の細胞内領域に会合する分子を酵母2ハイブリッド法でクローニングした結果、クラスリン小胞を形成するアダプター複合体AP-2の中μ2とCTLA-4がその細胞内領域のチロシンモチーフを介して会合することを明らかにした。このチロシンモチーフとμ2との結合によってCTLA-4のinternalizationが誘導されることを示した。更に、チロシンモチーフがチロシンリン酸化を受けることによってこの会合が阻害されることが判明した。リン酸化チロシンにはSHP-2がSH2領域によって会合してネガティブシグナルを伝達することが知られているので、CTLA-4はT細胞が活性化され発現しても、リン酸化を受けないうちはAP-2と会合して直ちにinternalizeされ、ほとんど細胞表面発現しないが、リン酸化されるとAP-2とは会合できず細胞表面に留まり、しかもSHP-2との会合を介してネガティブなシグナル伝達を行っていると考えられる。即ち、単一のチロシンのリン酸化によってinternalizationか、シグナル伝達かが制御されていることが明らかになった。チロシン変異分子をレトロウイルスで導入したT細胞がCTLA-4を高発現することから、この制御機構が正常のT細胞でも行われていることが判明した。また更に、CTLA-4のリン酸化を行うチロシンキナーゼを同定するため、種々のチロシンキナーゼとCTLA-4をco-transfectionする系で解析した結果、srcキナーゼFynとLckがCTLA-4と直接会合してリン酸化することが判明した。

Research Products
(16 results)

All Other

All Publications (16 results)

[Publications] Saijo,K.: "Crucial role of Jak3 in negative selection of self-reactive T cells" J. Exp. Med.185. 351-356 (1997)
[Publications] Yamazaski,T.: "A shift from negative to positive selection of autoreactive T cells by the reduced level of TCR signal in TCR-transgenic CD3ζ-deficient mice" J. Immunol.158. 1634-1640 (1997)
[Publications] Aoe,T.: "Heat shock protein 70 mRNA reflects the severity of ischemia/hypoxia-reperfusion injury in the perfused rat liver." Crit. Care Med.25. 324-329 (1997)
[Publications] Poole,A.: "The Fc receptor γ-chain and the tyrosine kinase Syk are essential for activation of mouse platelets by collagen." EMBO J.16. 2333-2341 (1997)
[Publications] Shiratori,T.: "Tyrosine phosphorylation controls internalization of CTLA-4 by regulating its interaction with chlathrin-associated adaptor complex AP-2." Immunity. 6. 583-589 (1997)
[Publications] Miyatake,S.: "Induction of interleukin-2 unresponsiveness and down-regulation of the JAK-STAT system upon activation through the T cell receptor." Eur. J. Immunol.27. 1816-1823 (1997)
[Publications] Takase,K.: "A novel 12kd dimer associated with pre-TCR complex and clonotype-independent CD3 complex on immature thymocvtes." J. Immunol.159. 741-747 (1997)
[Publications] Watanabe,N.: "Th1 and Th2 subsets equally undergo Fas-dependent and independent activation-induced cell daath." Eur. J. Immunol.27. 1858-1864 (1997)
[Publications] Watanabe,H.: "A novel acyl-CoA thioesterase enhances its enzymatic activity by direct binding with HIV nef." Biochem. Biophys. Res. Commun.238. 234-239 (1997)
[Publications] Kosugi,A.: "Subunit composition of the pre-T-cell receptor complex analyzed by monoclonal antibody against the pre-T-cell receptor α chain" Immunology. 91. 618-622 (1997)
[Publications] Arase,N.: "Association with FcRγ is essential for activation signal through NKR=P1 (CD161)NK cells and NK1. 1^+ T cells." J. Exp. Med.186. 1957-1963 (1997)
[Publications] Wakizaka,K.: "A novel 90kDa tyrosine-phosphorylated protein associated with TCR complex in thymocytes." Eur. J. Immunol.(in press).
[Publications] Saito,T.: "Kinases and phosphatases in lymphocyte and neuronal signaling." Springer-Verlag, Tokyo, Japan, 366 (1997)
[Publications] Yamazaski,T.: "Leucocyte typing VI white cell differentiation antigens" Garland Publishing, lnc., New York and London, 1342 (1997)
[Publications] Saijio,K.: "Leucocyte typing VI white cell differentiation antigens" Garland Publishing, lnc., New York and London, 1342 (1997)
[Publications] Saito,T.: "Critical Reviews in Immunology" (in press),

1997 Fiscal Year Annual Research Report

抗腫瘍免疫におけるT細胞活性化の制御

Principal Investigator

斉藤 隆 千葉大学, 医学部, 教授 (50205655)

Research Products

[Publications] Saijo,K.: "Crucial role of Jak3 in negative selection of self-reactive T cells" J. Exp. Med.185. 351-356 (1997)

[Publications] Yamazaski,T.: "A shift from negative to positive selection of autoreactive T cells by the reduced level of TCR signal in TCR-transgenic CD3ζ-deficient mice" J. Immunol.158. 1634-1640 (1997)

[Publications] Aoe,T.: "Heat shock protein 70 mRNA reflects the severity of ischemia/hypoxia-reperfusion injury in the perfused rat liver." Crit. Care Med.25. 324-329 (1997)

[Publications] Poole,A.: "The Fc receptor γ-chain and the tyrosine kinase Syk are essential for activation of mouse platelets by collagen." EMBO J.16. 2333-2341 (1997)

[Publications] Shiratori,T.: "Tyrosine phosphorylation controls internalization of CTLA-4 by regulating its interaction with chlathrin-associated adaptor complex AP-2." Immunity. 6. 583-589 (1997)

[Publications] Miyatake,S.: "Induction of interleukin-2 unresponsiveness and down-regulation of the JAK-STAT system upon activation through the T cell receptor." Eur. J. Immunol.27. 1816-1823 (1997)

[Publications] Takase,K.: "A novel 12kd dimer associated with pre-TCR complex and clonotype-independent CD3 complex on immature thymocvtes." J. Immunol.159. 741-747 (1997)

[Publications] Watanabe,N.: "Th1 and Th2 subsets equally undergo Fas-dependent and independent activation-induced cell daath." Eur. J. Immunol.27. 1858-1864 (1997)

[Publications] Watanabe,H.: "A novel acyl-CoA thioesterase enhances its enzymatic activity by direct binding with HIV nef." Biochem. Biophys. Res. Commun.238. 234-239 (1997)

[Publications] Kosugi,A.: "Subunit composition of the pre-T-cell receptor complex analyzed by monoclonal antibody against the pre-T-cell receptor α chain" Immunology. 91. 618-622 (1997)

[Publications] Arase,N.: "Association with FcRγ is essential for activation signal through NKR=P1 (CD161)NK cells and NK1. 1^+ T cells." J. Exp. Med.186. 1957-1963 (1997)

[Publications] Wakizaka,K.: "A novel 90kDa tyrosine-phosphorylated protein associated with TCR complex in thymocytes." Eur. J. Immunol.(in press).

[Publications] Saito,T.: "Kinases and phosphatases in lymphocyte and neuronal signaling." Springer-Verlag, Tokyo, Japan, 366 (1997)

[Publications] Yamazaski,T.: "Leucocyte typing VI white cell differentiation antigens" Garland Publishing, lnc., New York and London, 1342 (1997)

[Publications] Saijio,K.: "Leucocyte typing VI white cell differentiation antigens" Garland Publishing, lnc., New York and London, 1342 (1997)

[Publications] Saito,T.: "Critical Reviews in Immunology" (in press),

斉藤隆千葉大学, 医学部, 教授 (50205655)