1997 Fiscal Year Annual Research Report

NGF誘起神経突起伸長におけるコリン燐脂質代謝亢進の分子機構

Research Project

Project/Area Number	09259214
Research Institution	Gifu University
Principal Investigator	野澤義則岐阜大学, 医学部, 教授 (10021362)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	坂野喜子岐阜大学, 医学部, 講師 (50116852) 中島茂岐阜大学, 医学部, 助教授 (60188935)
Keywords	ホスホリパーゼD / 遺伝子クローニング / チロシンキナーゼ / 分化 / 増殖
Research Abstract	情報変換酵素ホスホリパーゼD(PLD)は分泌応答などの迅速応答から、細胞の増殖・分化といった中長期的応答にまで関与することから注目を集めている。我々はコリン作動性ニューロンモデルのPC12細胞のカテコラミン分泌に伴うシグナル変換機構では、コリン含有燐脂質のホスファチジルコリン(PC)を分解するPLDが重要であることを示した。また、PC12細胞、グリオーマC6細胞で分化誘導時にPLDl mRNAの発現が上昇するという知見を得ており、神経分泌のみならず神経突起伸長にもPLDが極めて重要な役割を果たしていると考えられる。そこで、PC12細胞ライブラリーを用いて、2種類のラットホスホリパーゼD(PLD)遺伝子rPLD1、rPLD2の全長ををクローニングし、FISH法により遺伝子座を決定した。また、PLDより産生されるPAの下流のシグナル分子の同定を進め、HL60細胞でPA依存性に活性化されるチロシンキナーゼを見いだし、その性状の解析を行っている。一方、PLDの活性化メカニズムについても検討を加え、分化HL60細胞ではPLD活性化にPI3-キナーゼが関与していることを示した。PI3-キナーゼの下流にはチロシンキナーゼが介在している可能性があり、Tec/Btkファミリーを含めて検討を加えている。さらに、PC12細胞では過酸化水素(H_2O_2)によりCa^<2+>依存性のチロシンキナーゼを介して著しくPLDが活性化されることを明らかにし、現在そのキナーゼの同定に着手している。今後は、PLDの活性化に関与する分子についてさらに検討を加えるとともに、さまざまなPLD変異体を発現したPC12細胞あるいはアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて、神経突起伸長におけるPLDの役割を明らかにする予定である。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Ohguchi,K.: "Enhancement of phospholipase D activity during differentiation in HL60cells:involvement of RhoA translocation to membranes" J.Biol.Chem.272. 1990-1996 (1997)
[Publications] Banno,Y.: "Nuclear ADP-ribosylation factor-and oleate-dependent phospholipase D in rat liver cells:Increases of ARF-dependent PLD activity in regenerating liver cells" J.Biol.Chem.272. 5208-5213 (1997)
[Publications] Yoshimura,S.: "Changes in the activity and mRNA levels of phospholipase D during ceramide-induced apoptosis in rat glial cells." J.Neurochem.69. 713-720 (1997)
[Publications] Ito,Y.: "Hydrogen peroxide-induced phospholipase D activation in rat pheochroma PC12 cells:Possible involvement of Ca^<2+>-dependent protein tyrosine kinase" J.Neurochem.69. 729-736 (1997)
[Publications] Kato,Y.: "Involvement of rho family proteins in prostaglandin F2α-induced phospholipase D activation in the osteoblast-like cell line MC3T3-E1" Prostaglandins. 54. 475-495 (1997)
[Publications] Hammond,S.M.: "Characterization of two alternately spliced forms of phospholipase D1" J.Biol.Chem.272. 3860-3868 (1997)
[Publications] Nakashima,S.: "The Platelet,(Lapetina,E.G.ed.)" JAI Press Inc., 19 (1997)
[Publications] Nakashima,S.: "Handbook of Experimental Pharmacology,Vol.126,Platelets and Their Factors 24" Spring-Verlag,15 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

NGF誘起神経突起伸長におけるコリン燐脂質代謝亢進の分子機構

Principal Investigator

野澤 義則 岐阜大学, 医学部, 教授 (10021362)

Research Products

[Publications] Ohguchi,K.: "Enhancement of phospholipase D activity during differentiation in HL60cells:involvement of RhoA translocation to membranes" J.Biol.Chem.272. 1990-1996 (1997)

[Publications] Banno,Y.: "Nuclear ADP-ribosylation factor-and oleate-dependent phospholipase D in rat liver cells:Increases of ARF-dependent PLD activity in regenerating liver cells" J.Biol.Chem.272. 5208-5213 (1997)

[Publications] Yoshimura,S.: "Changes in the activity and mRNA levels of phospholipase D during ceramide-induced apoptosis in rat glial cells." J.Neurochem.69. 713-720 (1997)

[Publications] Ito,Y.: "Hydrogen peroxide-induced phospholipase D activation in rat pheochroma PC12 cells:Possible involvement of Ca^<2+>-dependent protein tyrosine kinase" J.Neurochem.69. 729-736 (1997)

[Publications] Kato,Y.: "Involvement of rho family proteins in prostaglandin F2α-induced phospholipase D activation in the osteoblast-like cell line MC3T3-E1" Prostaglandins. 54. 475-495 (1997)

[Publications] Hammond,S.M.: "Characterization of two alternately spliced forms of phospholipase D1" J.Biol.Chem.272. 3860-3868 (1997)

[Publications] Nakashima,S.: "The Platelet,(Lapetina,E.G.ed.)" JAI Press Inc., 19 (1997)

[Publications] Nakashima,S.: "Handbook of Experimental Pharmacology,Vol.126,Platelets and Their Factors 24" Spring-Verlag,15 (1997)

野澤義則岐阜大学, 医学部, 教授 (10021362)