1997 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
09261201
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
新田 勝利 北海道大学, 大学院・理学研究科, 教授 (80001858)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河野 敬一 北海道大学, 大学院・理学研究科, 助教授 (10136492)
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Keywords | リゾチーム / ホールディング |
Research Abstract |
新しいカルシウム結合リゾチーム ヒグマのミルクリゾチームを単離精製し、アミノ酸配列の決定を試みた。現在4残基を残して決定された。予想どうりα-ラクトアルブミンと同様のカルシウム結合部位をもっていた(未発表)。 カルシウム結合定数の決定 ヒグマ、ハリモグラ(単孔類)、イヌのミルクリゾチームのカルシウム結合定数をQuin-2を地居て決定した。結果を既知のカルシウム結合リゾチーム、α-ラクトアルブミンと比較した。結合強度に1桁以上の変異があるが変化に統一性は見られない(投稿中)。 ヒトリゾチームにカルシウム結合部位を不完全導入した変異体ではQ86D/D91Q/A92Dの2Asp変異体が2X10^4M^<-1>の結合定数を示した。 カルシウム結合リゾチームのUnfolding-Refolding Profile これまでウマミルクリゾチームはアルファーラクトアルブミンと同様に安定なモルテングロビュール状態をとるがハト卵白リゾチームはconventional lysozymeと同様に安定なモルテングロビュール状態は存在しないことが知られていた(Nitta et al.,1993)。イヌリゾチームはウマリゾチームと同様にグアニジン変性において安定なモルテングロビュール状態が観察されたがハリモグラのリゾチームではそれが観察されず、ハトリゾチームと同様であった。アミノ酸配列の比較からカルシウム結合リゾチームには真獣類ミルクリゾチームと単孔類-鳥類リゾチーム2つの系統があるとする考えがあるがFolding Profileはこの2つの系統で異なった挙動を示した(投稿中)。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] M.Mizuguchi: "Partial Moter Volumes and Adiabatic Compressibilities of N-Acetyl-AL-Scrinamide and N-acetyl-L-Threoninamide in ailute Aqueous Solutions" J.Solution Chem.26(6). 579-594 (1997)
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[Publications] M.Mizuguchi: "FT-IR Study of the Ca^<2+>-Binding to Bovine L.Lactalhamin" FEBS Letters. 417(1). 153-156 (1997)
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[Publications] M.Mizuguchi: "FT-IR Studies on the Coordination of the side-Chain Coo^-groups to Ca^<2+> in Eguire Lysogyml" Eur.J.Biochem.250(1). 72-76 (1997)
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[Publications] Y.Yasuda: "Partial Molar Volumes and adiabatic Conpressions of Hydrophylic Amino Acid in Qilute Aqueous Soluttion at 5,15,25,35 and 45°C" J.Chem.Eng.Data. in press.
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[Publications] T.Aizawa: "Adsorption of Human Lysozyml on to Hydroxyapatite" FEBS Letters. in press.
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[Publications] M.Sakurai: "Partial Molar Iscntropic Compressions of Alkyl Acetates in Water" J.Chem.Eng.Data. in press.