1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09264201
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
山下 正兼 北海道大学, 大学院・理学研究科, 助教授 (30202378)
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| Keywords | 卵成熟 / 魚類 / 両生類 / mRNA / MPF / cdc2 / サイクリンB |
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| Research Abstract |
本研究は卵成熟における減数分裂再開の分子機構の解明を目的とし、以下の2点について調べた。
1)卵成熟促進因子(MPF)の形成、活性化機構
魚類やアフリカツメガエル以外の動物におけるMPFの形成・活性化には、サイクリンBmRNAのマスキングとその解除が直接関わる。これらに関与すると考えられるYボックス蛋白質、Nanos、PumilioのcDNAクローニングを行い、抗体を作製した。現在、これら抗体を用いた解析を進めている。また、ホルモン刺激のmRNA翻訳への影響を調べる目的で、ホルモン刺激したゼブラフィッシュ未成熟卵にサイクリンBmRNAを注射する実験を行った。その結果、サイクリンBmRNAの注射に対して、ホルモン刺激を受けた卵母細胞の方が未刺激のものより早く成熟することがわかった。このことはホルモン刺激によりサイクリンBmRNAの翻訳効率が高まることを示唆する。この分子機構の解析に着手した。
2)MPFの作用機構
MPFの下流で作用し、染色体凝縮に関与すると考えられるMAPキナーゼ様蛋白質の分子同定のため、ゼブラフィシュMAPキナーゼcDNAを単離し、抗体を作製した。現在、この抗体を用い、MAPキナーゼ様蛋白質がMAPキナーゼそのものかどうかを調べている。また、アカガエル未成熟卵にpre-MPFがないことを利用して、サイクリンB1とB2の機能分担を解析した。その結果、アカガエル卵成熟過程でのサイクリンBサブタイプの機能は、少なくともGVBDの誘起については重複していることが示された。
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[Publications] Tokumoto Mika: "Involvement of 26S proteasome in oocyte maturation of goldfish Carassius auratus." Zoological Science. 14. 347-351 (1997)
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[Publications] Shimizu Yohei: "Spermiogenesis without preceding meiosis in the hybrid medaka between Oryzias Iatipes and O.curvinotus." Journal of Experimental Zoology. 279. 102-112 (1997)
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[Publications] Kondo Tomoko: "Introduction of cyclin B induces activation of the maturation-promoting factor and breakdown of germinal vesicle in growing zebrafish oocytes unresponsive to the maturation-inducing hormone." Developmental Biology. 190. 142-152 (1997)
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[Publications] Tokumoto Toshinobu: "Initiation of cyclin B degradation by 26S proteasome upon egg activation." Journal of Cell Biology. 138. 1313-1322 (1997)
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[Publications] Katsu Yoshinao: "Isolation and characterization of goldfish Y box protein,a germ cell-specific RNA-binding protein." European Journal of Biochemistry. 249. 854-861 (1997)
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[Publications] 山下正兼: "魚類生殖細胞の形成と成熟の制御機構" 生化学. 69. 1246-1260 (1997)
