1997 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
09265214
|
|---|
| Research Institution | National Institute of Genetics |
|---|
Principal Investigator |
上田 均 国立遺伝学研究所, 個体遺伝研究系, 助手 (60201349)
|
|---|
| Keywords | 脱皮 / 変態 / 標的遺伝子 / 遺伝子発現制御 / エクダイソン / コアクチベータ- |
|---|
| Research Abstract |
(1)FTZ-F1遺伝子の発現制御の解析
FTZ-F1遺伝子発現制御領域内のDHR3結合部位に変異を導入し、この発現制御領域とLacZ融合遺伝子を有するtransgenic fly系統を作成し、LacZ遺伝子の発現パターンを解析した。変異型融合遺伝子の発現パターンは、野生型の発現制御領域を持つ融合遺伝子の発現パターンと比べると、発現時期に違いは観察されなかったが、発現レベルが著しく低下した。このことから、DHR3は、positiveに働く因子のひとつであると考えられた。次に,FTZ-F1遺伝子転写開始点付近の様々なDNA断片とLacZ融合遺伝子を有するtransgenic fly系統を作成し、LacZ遺伝子の発現パターンを解析した。その結果、転写開始点の上流-2.4〜-0.7kbを有する融合遺伝子では、エクジソンの濃度が高い時期からの発現が観察され、-0.7〜0kbあるいは-3.7〜2.4kbにエクジソン高濃度下でnegativeに制御する領域があることが判明した。
(2)FTZ-F1とそのコアクチベータ-の発現パターンの解析
BmFTZ-F1と、そのコアクチベータ-であるMBF1とMBF2の抗体を用い、カイコの4齢から5齢期の絹糸腺におけるこれら3つの因子の存在量および細胞内局在を調べた。BmFTZ-F1は、4齢脱皮約半日前のスピクルステージD3からあらわれ、脱皮後速やかに消失した。MBF1の存在量に大きな変化がみられなかったが、MBF2は、4齢始めからスピラクルステージD3まで存在し、その後速やかに消失し、脱皮後再び現れた。BmFTZ-F1は、核に局在したが、MBF1とMBF2は、通常はほとんど細胞質に局在し、スピラクルステージD3の時期にのみ核に局在した。以上の結果、MBFの存在量および細胞内局在は、眼期内で時期的に制御されており、脱皮過程において何らかの意味がある可能性が示された。
|
Research Products
(3 results)
-
[Publications] K.Takemaru: "Multiprotein bridging factor 1(MBF1)is an evolutionarily conserved transcriptional coactivator that connects a regulatory factor and TATA element-binding protein" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 94. 7251-7256 (1997)
-
[Publications] Li,F.-Q.et al: "Transcriptional activation through interaction of MBF2 with TFIIA." Genes to Cells. 2. 143-153 (1997)
-
[Publications] Y.Kageyama, et al.: "Temporal regulation of the mid-prepupal gene FTZ-F1:DHR3 early late gene product is one of the plural positive regulators" Genes to Cells. 2. 559-569 (1997)
