1997 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトMSH3蛋白質の機能解析

Research Project

Project/Area Number	09269224
Research Institution	Nippon Medical School
Principal Investigator	池島三与子日本医科大学, 医学部, 講師 (30246938)
Keywords	ミスマッチ修復 / 発癌 / DNA修復蛋白質 / ゲノム不安定性
Research Abstract	私達は昨年バキュロウイルス系で発現したhMSH3を含むヘテロ二量体(hMSH2/hMSH3)がループを持つミスマッチに選択的に結合することを示した(Curr.Biol.,6:1181-1184,1996)。塩基置換ミスマッチに結合するヘテロ二量体(hMSH2/hMSH6)がhMutSαとすでに名付けられていることから、この二量体をhMutSβと命名した。3種のMutSホモログ(hMSH2,hMSH6,hMSH3)から成る2種のヘテロ二量体(hMutSα,hMutSβ)によるミスマッチ結合モデルは真核生物における共通の分子機構と考えられている。本年は2種のヘテロ二量体(hMutSα,hMutSβ)がヒト細胞抽出液に存在することをゲルシフト法で確かめた。さらに3種のMutSホモログの細胞における発現量をNorthern blotにより比べると、hMSH2:hMSH6:hMSH3=1:0.6:0.2であった。hMSH3遺伝子が約100倍に増幅しているメソトレキセート(MTX)耐性細胞ではhMSH2:hMSH6:hMSH3=1:0.6:15.6であり、ヘテロ二量体の形成がhMutSβに片寄っていることが予想された。実際MTX耐性細胞ではゲルシフト法を行うとhMutSαの複合体の形成が抑えられており、塩基置換ミスマッチであるG/Gミスマッチの修復活性が低下していることが観察された。次にhMSH3の発癌への関与を変異解析により検討した。79例の孤発性大腸癌患者のゲノム不安定性を5箇所のマイクロサテライトを用いて検討すると5例が不安定性を示し、それらはTGF-βRIIのAリピートの欠失変異あるいは塩基置換変異を伴っていた。そのうちの1例においてはhMSH3の(A)8部位でのAの挿入と欠失が認められた。これらのことより、ゲノム不安定性を呈する弧発性大腸癌の一部は、ゲノム不安定性の結果TGF-βRIIの不活化に至ったと考えられ、不安定性の増強にhMSH3遺伝子の変異が寄与したと推測された。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Orimo,H.et al.: "A novel missense mutation and frameshift mutations in the type II receptor of transforming growth factor-β gene in sporadie colon cancer with microsatellite instability." Mutation Research Genomics. in press. (1998)
[Publications] 池島三与子他: "癌抑制蛋白質と制癌剤;ミスマッチ修復蛋白質" 癌と化学療法. 24. 1392-1399 (1997)
[Publications] Palombo,F.et al.: "hMutSβ,a heterodimer of hMSH2 and hMSH3,binds to insertion/deletion loops in DNA." Current Biology. 6. 1181-1184 (1996)
[Publications] Watanabe,A.et al.: "Genomic organization and expression of the human MSH3 gene." Genomics. 31. 311-318 (1996)
[Publications] Nakajima,E.et al.: "Nine-bp repeat polymorphism in exon 1 of the hMSH3 gene." Jpn.J.Human Genet,. 40. 343-345 (1995)
[Publications] Inokuchi,K.et al.: "Loss of expression of the human MSH3 gene in hematological malignancies." Biochem.Biophys.Res.Commun.214. 171-179 (1995)
[Publications] 池島三与子他: "「DNA複製・修復と発癌」(松影昭夫編)のうち第II章の3「ミスマッチ修復の分子機構と発癌」" 羊土社, 15 (1996)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトMSH3蛋白質の機能解析

Principal Investigator

池島 三与子 日本医科大学, 医学部, 講師 (30246938)

Research Products

[Publications] Orimo,H.et al.: "A novel missense mutation and frameshift mutations in the type II receptor of transforming growth factor-β gene in sporadie colon cancer with microsatellite instability." Mutation Research Genomics. in press. (1998)

[Publications] 池島 三与子 他: "癌抑制蛋白質と制癌剤;ミスマッチ修復蛋白質" 癌と化学療法. 24. 1392-1399 (1997)

[Publications] Palombo,F.et al.: "hMutSβ,a heterodimer of hMSH2 and hMSH3,binds to insertion/deletion loops in DNA." Current Biology. 6. 1181-1184 (1996)

[Publications] Watanabe,A.et al.: "Genomic organization and expression of the human MSH3 gene." Genomics. 31. 311-318 (1996)

[Publications] Nakajima,E.et al.: "Nine-bp repeat polymorphism in exon 1 of the hMSH3 gene." Jpn.J.Human Genet,. 40. 343-345 (1995)

[Publications] Inokuchi,K.et al.: "Loss of expression of the human MSH3 gene in hematological malignancies." Biochem.Biophys.Res.Commun.214. 171-179 (1995)

[Publications] 池島 三与子 他: "「DNA複製・修復と発癌」(松影昭夫編)のうち第II章の3「ミスマッチ修復の分子機構と発癌」" 羊土社, 15 (1996)

池島三与子日本医科大学, 医学部, 講師 (30246938)

[Publications] 池島三与子他: "癌抑制蛋白質と制癌剤;ミスマッチ修復蛋白質" 癌と化学療法. 24. 1392-1399 (1997)

[Publications] 池島三与子他: "「DNA複製・修復と発癌」(松影昭夫編)のうち第II章の3「ミスマッチ修復の分子機構と発癌」" 羊土社, 15 (1996)