1997 Fiscal Year Annual Research Report

チロシンキナーゼを標的とした生体機能制御

Research Project

Project/Area Number	09273225
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	浜口道成名古屋大学, 医学部, 教授 (90135351)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	岩田啓之名古屋大学, 医学部, 助手 (30273197)
Keywords	チロシンキナーゼ / チロシンリン酸化 / 細胞骨格 / カドヘリン / 細胞間接着 / マトリックスメタロプロテイナーゼ
Research Abstract	本年度は、レドックス依存の新規のSrc活性化機構に焦点を絞り実験を進めた。我々は、Srcキナーゼがシステイン残基に依存して、塩化第二水銀やNOによる酸化還元反応によってキナーゼの活性化を受ける事を見い出した。そこでSrcキナーゼのシステイン残基を点突然変異させ、キナーゼ活性や細胞癌化能に対する影響を調べた。v-Srcキナーゼの場合、全長526アミノ酸残基中に10個のシステイン残基を含む。本年は、これらすべてのシステインをアラニンに点突然変異させると共に、バキュロウイルス p「スSrc蛋白質の大量産生系を確立した。これらのシステイン残基の内、6番目から9番目がキナーゼ活性ドメインのC末端側に位置するが、8、9番に突然変異を導入したものは、癌化能が温度感受性となり、Src蛋白質の崩壊が起きることが示唆された。この結果は、キナーゼ活性ドメイン中のシステイン残基が、Srcキナーゼの安定性に重要であることを示唆する。今後これらの変異型Srcキナーゼの、塩化第二水銀、NO等に対する反応につて解析する予定である。更に、バキュロウイルスを用い、Srcキナーゼを大量産生、精製するシステムを確立した。このシステムで精製したSrcキナーゼを用いて、塩化第2水銀等によるTyr527非依存キナーゼ活性化が確認された。今後、このシステムを用いて、塩化第2水銀の結合部位を同定する予定でいる。

Research Products
(10 results)

All Other

All Publications (10 results)

[Publications] Shibata,K.et al.: "Fibronectin secretion from human peritoneal tissue induces Mr 92,000 type IV collagenase expression and invasion in ovarian cancer cell lines" Cancer R.57. 5416-5420 (1997)
[Publications] Shibata,K.et al.: "Both focal adhesion kinase and c-Ras are required for the enhanced Matrix Metalloproteinase-9(MMP-9)secretion by fibronectin" Cancer R.in press.
[Publications] Sabe,H.et al.: "Cell to substratum adhesion is involved in v-Src-induced cellular protein tyrosine phosphorylation:implication for the adhesion-regulated protein tyrosine" Oncogene. 14. 1779-1788 (1997)
[Publications] Thant,A.A.et al.: "c-Ras is required for the activation of the matrix metalloproteinases by Concanavalin A in 3Y1 cells." FEBS Lett. 406. 28-30 (1997)
[Publications] Towatari,M.et al.: "Constitutive activation of mitogen-activated protein kinase pathway in acute leukemia cells." Leukemia. 11. 479-484 (1997)
[Publications] Ohta,S.et a,: "Hyaluronate acti vates tyrosine phosphorylation of cellular proteins including focal adhesion kinase via CD44 in human glioma cells." Int.J.Onc.10. 561-564 (1997)
[Publications] Akhand,A.A.et al.: "Magnitude of protein tyrosine phosphorylation-linked signals determines growth versus death of thymic T lymphocytes." Eur.J.Immunol. 27. 1254-1259 (1997)
[Publications] Imaizumi,M.et al.: "Role of tyrosine specific phosphorylation of cellular proteins,especially EGF receptor and p125 FAK in human lung cancer cells." Lung Cancer. 17. 69-84 (1997)
[Publications] Towatari,M.et al.: "Hematopoietic transcription factor GATA-2 activates transcription from HIV-1 long terminal repeat." AIDS. 12. 253-259 (1998)
[Publications] Isogai,C.et al.: "Sphingosine induced apoptosis in human leukemia cell line,TF1 and its bc12 transfectant." Expt.Hemato.(in press).

1997 Fiscal Year Annual Research Report

チロシンキナーゼを標的とした生体機能制御

Principal Investigator

浜口 道成 名古屋大学, 医学部, 教授 (90135351)

Research Products

[Publications] Shibata,K.et al.: "Fibronectin secretion from human peritoneal tissue induces Mr 92,000 type IV collagenase expression and invasion in ovarian cancer cell lines" Cancer R.57. 5416-5420 (1997)

[Publications] Shibata,K.et al.: "Both focal adhesion kinase and c-Ras are required for the enhanced Matrix Metalloproteinase-9(MMP-9)secretion by fibronectin" Cancer R.in press.

[Publications] Sabe,H.et al.: "Cell to substratum adhesion is involved in v-Src-induced cellular protein tyrosine phosphorylation:implication for the adhesion-regulated protein tyrosine" Oncogene. 14. 1779-1788 (1997)

[Publications] Thant,A.A.et al.: "c-Ras is required for the activation of the matrix metalloproteinases by Concanavalin A in 3Y1 cells." FEBS Lett. 406. 28-30 (1997)

[Publications] Towatari,M.et al.: "Constitutive activation of mitogen-activated protein kinase pathway in acute leukemia cells." Leukemia. 11. 479-484 (1997)

[Publications] Ohta,S.et a,: "Hyaluronate acti vates tyrosine phosphorylation of cellular proteins including focal adhesion kinase via CD44 in human glioma cells." Int.J.Onc.10. 561-564 (1997)

[Publications] Akhand,A.A.et al.: "Magnitude of protein tyrosine phosphorylation-linked signals determines growth versus death of thymic T lymphocytes." Eur.J.Immunol. 27. 1254-1259 (1997)

[Publications] Imaizumi,M.et al.: "Role of tyrosine specific phosphorylation of cellular proteins,especially EGF receptor and p125 FAK in human lung cancer cells." Lung Cancer. 17. 69-84 (1997)

[Publications] Towatari,M.et al.: "Hematopoietic transcription factor GATA-2 activates transcription from HIV-1 long terminal repeat." AIDS. 12. 253-259 (1998)

[Publications] Isogai,C.et al.: "Sphingosine induced apoptosis in human leukemia cell line,TF1 and its bc12 transfectant." Expt.Hemato.(in press).

浜口道成名古屋大学, 医学部, 教授 (90135351)