1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09304074
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Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
杉浦 昌弘 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 教授 (80027044)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
廣瀬 哲郎 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 助手 (30273220)
杉田 護 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (70154474)
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| Keywords | タバコ / プラスチド / 翻訳 / RNAエディティング / 開始コドン / in vitro / mRNA / シストロン |
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| Research Abstract |
本研究はタバコのプラスチドより調製したin vitro翻訳系を用いて、プラスチド翻訳の分子機構を解明することを目的とする。
(1)開始コドンの決定
タバコのプラスチドのndh DmRNAは、AUGとGUGの2ヶの開始コドンが存在する。その下流ACGがRNAエディティングにAUGになり、更に1ヶの開始コドンがRNAレベルで生成する。各種変異mRNAの翻訳をin vitro系で調べるとRNAエディティングの結果生じたAUGのみが実際に開始コドンとして働くことを明らかにした。
(2)開始コドンAUGとGUGの効率
psbCmRNAはGUGを持つが、in vitro系でこのGUGが開始コドンとして働くことを明らかにした。ついで、このGUGをAUGに変えたmRNAは、翻訳効率が10倍くらい上昇することを示したので、プラスチドに於いてもGUGに比べAUGが開始コドンとして効率が著しく良いことを明らかにした。
(3)ジ・シストロニックmRNAの翻訳
psaCとndhDはジ・シストロニックmRNAである。これがそのままでは、翻訳されず、シストロン間で切断されることにより始めて翻訳されることを明らかにした。
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[Publications] M.Sugiura: "Plant in vitro transcription systems." Annu.Rev.Plant Physiol.Plant Mol.Biol.48. 383-398 (1997)
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[Publications] S.Kappor, J.Y.Suzuki and M.Sugiura: "Identification and functional significance of a new class of non-consensus-type plastid promoters." Plant J.11. 327-337 (1997)
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[Publications] K.Moriguchi, M.Sugita and M.Sugiura: "Structure and subcellular localization of a small RNA-binding protein from tobacco." Plant J.12. 215-221 (1997)
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[Publications] T.Wakasugi, M.Kapoor, M.Sugita, K.Yoshinaga and M.Sugiura: "Complete sequencing of the chloroplast genome of the green alga Chlorella vulgaris reveals the existence of genes possibly involved in chloroplast division." Proc.Natl. Acad.Sci.USA. 94. 5967-5972 (1997)
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[Publications] Y.Yukawa, M.Sugita and M.Sugiura: "Efficient in vitro transcription of plant nuclear tRNA^<Ser> genes in a nuclear extract from tobacco cultured cells." Plant J.12. 965-970 (1997)
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[Publications] T.Hirose and M.Sugiura: "Both RNA editing and RNA cleavage are required for translation of tobacco chloroplast ndhD mRNA : a possible regulatory mechanism for expression of a chloroplast operon consisting of functionally unrelated genes." EMBO J.16. 6804-6811 (1997)
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[Publications] S.Kapoor and M.Sugiura: "Expression and regulation of plastid genes. In “Photosynthesis : A Comprehensive Treatise"" Cambridge Univ.Press,U.K., 72-86 (1998)
