1998 Fiscal Year Annual Research Report
生体内分離冷却肝潅流による肝臓特異的遺伝子導入-肝臓外科手技による遺伝子治療の可能性
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09307027
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Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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| Research Institution | University of the Ryukyus |
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Principal Investigator |
草野 敏臣 琉球大学, 医学部, 助教授 (10244295)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白石 祐之 琉球大学, 医学部・附属病院, 講師 (00264482)
武藤 良弘 琉球大学, 医学部, 教授 (60157724)
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| Keywords | アデノウイルス / 遺伝子導入 / ブタ / ラット / von Willebrand factor / HVJリポソーム / レトロウイルス |
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| Research Abstract |
ブタなどの大動物の肝臓に対する生体内での遺伝子導入を達成することは, (ブタから)ヒトへの異種移植やヒト肝臓への遺伝子治療を実現するためのステップとして極めて重要である。しかし,生体内でのブタ肝臓対する有効な遺伝子導入法は報告されていない。われわれは生体内分離冷却肝潅流法を用い,長時間,高濃度のadenovirus vectorをブタの肝臓と接触させ,さらにこれと全身免疫抑制を組み合わせることにより,adenoviral vectorによるブタ生体肝臓への高レベルの遺伝子導入に成功した。これらについては、国内外の学会発表と論文発表をおこなった。
また本法を応用することにより,従来導入効率が低いとされるretrovirus vectorについても,肝切除後のラット肝臓に高レベルの遺伝子導入が可能であった(論文投稿中)。またretrovirus vectorの遺伝子導入効率を著しく高める可能性がある,pseudotyped retrovirus vectorを用いた遺伝子導入においても同様の実験を行い,高率の肝臓への導入効果を得た(論文投稿中)。これらのretrovirus vectorをもちいた遺伝子導入の方法論を用いて,生体肝臓(ラット,ブタ)へのvon Willbrand factorの遺伝子導入効果を検討する予定である。
またvon Willbrand factorを運ぶ,HVJリポソーム法を用いたベクターを作製中であり,これについてもわれわれの遺伝子導入法を検討する予定である。さらに,in-vitroにおいてVon Willbrand factorの血管内皮への遺伝子導入をおこない,これを肝類洞内に定着させることによる遺伝子導入効果についても検討中である。
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[Publications] M Shiraishi,S Hiroyasu,et al.: "Retroviral mediated gene transfer of transforming growth factor-beta 1(TGF-β1)in the rat model of fulminant hepatic failure" HEPATOLOGY28(4):393A. 28(4). 393A (1998)
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[Publications] Shiraishi M,Nozato E,et al.: "In-situ perfusion of the liver as a stable model of cold ischemia in orthotopic liver transplantation" Ryukyu Med J.18(3). 73-77 (1998)
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[Publications] Masayuki Shiraishi,Masayoshi Nagahama,et.al.: "Successful Gene Transfer to the Porcine Liver in Vivo with an Adenoviral Vector" Journal of Surgical Research. 76(2). 105-110 (1998)
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[Publications] Taira K,Shiraishi M,et.al.: "A new,Stable Model of Left Lobectomy for Living Related Liver Transplantation in the Pig" Transplantation Proceedings. 30(7). 3207-3208 (1998)
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[Publications] Nozato E,Shiraishi M,et al: "In-Situ Perfusion of the Liver Under a Porto-Systemic Shunt In Rats:A Model of Ischemia/Reperfusion Injury in Liver Transplantation" Transplantation Proceedings. 30(7). 3718-3720 (1998)
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[Publications] Shiraishi M,Hiroyasu S,et.al.: "Adenoviral Mediated Gene Transfer To The Porcine Liver In Vivo Using In Situ Perfusion of The Liver" Transplantation Proceedings. 30(7). 2914-2916 (1998)
