1999 Fiscal Year Annual Research Report
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09356010
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
森 裕司 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (40157871)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 建樹 帝国臓器株式会社, 研究本部天然物研究部, 主任研究員
額田 恭郎 理化学研究所, 細胞制御科学研究室, 専任研究員
塩田 邦郎 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80196352)
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| Keywords | ウマ絨毛性性腺刺激ホルモン(eCG) / ウマ卵胞刺激ホルモン(eFSH) / 糖鎖修飾 |
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| Research Abstract |
ウマ絨毛性性腺刺激ホルモン(eCG)製剤は家畜の生産性向上や遺伝子導入/ノックアウト動物作出のための過剰排卵の誘起など、応用・基礎両方で極めて重要な役割を果たしてきた。ところが抽出eCG製剤は、原料である妊娠馬血清を外国に依存しているため入手量が不安定であるや、不特定多数の妊娠馬の血液を利用するために様々な感染症の伝搬媒体となる可能性がある、いった問題が提起されていた。そのため遺伝子組換えによる、品質の安定した安全な製剤の開発が望まれ、試みられてきた。ところが、eCGはαサブユニットとβサブユニットが非共有結合により構成されるヘテロダイマーであること、さらに、両サブユニットに付加されている糖鎖が生理活性に大きく影響していることから、遺伝子組換えによるeCGの生産はこれまで実用化されていなかった。前年度までの研究により、我々は、糖鎖付加のほとんどないeCG変異体でもFSH様活性が見られること、また、eCGのα、β量鎖を結合タンパクとして発現・調整してもFSH様活性を有することを明らかにし、大腸菌を用いたeCG製剤生産の基礎を築いた。本年度は、これらの知見に基づいて、小スケールでの大腸菌培養によるeCG生産の条件設定を行った。eCGはFSH様活性以外に黄体形成ホルモン様活性も有する。そこで、純粋な排卵誘発製剤、すなわちeFSH製剤開発の可能性を探るため、eFSHβサブユニット遺伝子を新たにクローニングした。これを用いて、糖鎖欠失eFSH変異体の活性解析を行ったとろ、eFSHの生理活性には糖鎖が不可欠であるこが明らかになり、eCGの持つFSH様活性は、eFSHそのものの生理活性発現機構とは異なった機構により発現することが示唆された。
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