1999 Fiscal Year Annual Research Report

植物由来のホルモン様ペプチド遺伝子導入による植物の胚形成・再分化の効率化

Research Project

Project/Area Number	09460005
Research Institution	Yokohama City University, Kihara Institute for Biological Research
Principal Investigator	平野久横浜市立大学, 木原生物学研究所, 教授 (00275075)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐々英徳横浜市立大学, 木原生物学研究所, 助手 (50295507)
Keywords	植物ホルモン様ペプチド / レグインスリン / 遺伝子導入 / 形質転換 / ニンジン
Research Abstract	レグインスリンは、レグインスリン結合蛋白質のリン酸化活性の亢進し、培養植物細胞の分化や胚形成、ならびに細胞分裂に影響を及ぼすホルモン様ペプチドである。ニンジンの下胚軸切片を、センスあるいはアンチセンスレグインスリン遺伝子を導入したTiプラスミドを含むアグロバクテリウムと共存培養し、植物体を再生させた結果、培養1か月ほどでカルスが形成される下胚軸が現れ、3か月ほどで下胚軸由来のカルスから不定胚が得られ、不定胚のいくつかはシュートに成長した。成長した形質転換体を無菌状態で生育させた後、鉢上げして温室に移し、表現型の変化を解析した。しかし、intactな形質転換体の成長速度には大きな変化は見られず、外見も非形質転換体と変わりがなかった。しかし、形質転換体カルスの成長や分化の様子を詳しく調べたところ、センス遺伝子導入直後のカルスの増殖にはかなり明瞭な違いがあることがわかった。レグインスリン遺伝子を導入した系統カルスは非形質転換体と比較して、増殖速度が速く、培養3週間目には、その大きさは非形質転換体の3-4倍になっていた。この傾向は、繰り返し実験でも確認された。このことから、レグインスリンはカルスの初期成長に顕著な効果があると考えられた。一方、レグインスリンとインスリンの機能の類似性から、インスリンのようにヒト培養細胞の分裂を促進する作用がレグインスリンにも存在する可能性があると考えられた。そこで、ヒト培養細胞に対するレグインスリンの効果をヒトインスリンを対照として調べた。その結果、レグインスリンにはインスリンほど効果的ではないが、培養細胞の分裂を促進する効果が認められた。

Research Products
(9 results)

All Other

All Publications (9 results)

[Publications] Kawakami,T.: "Isolation and characterization of cytosolic and membranebound deubiquitinylating enzymes from bovine brain."J.Biochem.. 126. 612-623 (1999)
[Publications] Kurioka,A.: "Primary structure and possible functions of a trypsin inhibitor of Bombyx mori."Eur.J.Biochem.. 259. 120-126 (1999)
[Publications] Jianzhong,T.: "Analysis of leginsulin gene in soybean cultivar (Glycine max) and wild species (Glycine soja)."Chin J,Appl,Environ.Biol.. 5. 259-263 (1999)
[Publications] Jianzhong,T.: "Construction of expression vector for glycinin gene and its transformation to Morus alba."Sci.Seric.. 25. 5-10 (1999)
[Publications] Hirano,H.: "Two-dimensional gel electrophoresis using immobilized pH gradient tube gels."Electrophoresis. 21. 440-445 (2000)
[Publications] Kimura,Y.: "N-acetylation and proteolytic activity of the yeast 20S proteasome."J.Biol.Chem.. 275. 4635-4639 (2000)
[Publications] 高岡素子: "ダイズレグインスリン遺伝子導入によるニンジン形質転換体の作出"鎌倉女子大学紀要. (印刷中).
[Publications] 菅野純夫,平野久: "電気泳動最新プロトコール"羊土社. 183 (1999)
[Publications] 平野久: "プロテオミクスの基礎"講談社サイエンティフィック(印刷中).

1999 Fiscal Year Annual Research Report

植物由来のホルモン様ペプチド遺伝子導入による植物の胚形成・再分化の効率化

Principal Investigator

平野 久 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 教授 (00275075)

Research Products

[Publications] Kawakami,T.: "Isolation and characterization of cytosolic and membranebound deubiquitinylating enzymes from bovine brain."J.Biochem.. 126. 612-623 (1999)

[Publications] Kurioka,A.: "Primary structure and possible functions of a trypsin inhibitor of Bombyx mori."Eur.J.Biochem.. 259. 120-126 (1999)

[Publications] Jianzhong,T.: "Analysis of leginsulin gene in soybean cultivar (Glycine max) and wild species (Glycine soja)."Chin J,Appl,Environ.Biol.. 5. 259-263 (1999)

[Publications] Jianzhong,T.: "Construction of expression vector for glycinin gene and its transformation to Morus alba."Sci.Seric.. 25. 5-10 (1999)

[Publications] Hirano,H.: "Two-dimensional gel electrophoresis using immobilized pH gradient tube gels."Electrophoresis. 21. 440-445 (2000)

[Publications] Kimura,Y.: "N-acetylation and proteolytic activity of the yeast 20S proteasome."J.Biol.Chem.. 275. 4635-4639 (2000)

[Publications] 高岡素子: "ダイズレグインスリン遺伝子導入によるニンジン形質転換体の作出"鎌倉女子大学紀要. (印刷中).

[Publications] 菅野純夫,平野 久: "電気泳動最新プロトコール"羊土社. 183 (1999)

[Publications] 平野 久: "プロテオミクスの基礎"講談社サイエンティフィック(印刷中).

平野久横浜市立大学, 木原生物学研究所, 教授 (00275075)

[Publications] 菅野純夫,平野久: "電気泳動最新プロトコール"羊土社. 183 (1999)

[Publications] 平野久: "プロテオミクスの基礎"講談社サイエンティフィック(印刷中).