1999 Fiscal Year Annual Research Report
prunus属果樹における配偶体型自家不和合性の機構解明とその園芸育種学的利用
Project/Area Number |
09460018
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
田尾 龍太郎 京都大学, 大学院・農学研究科, 助手 (10211997)
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Keywords | S-RNase / カンカオウトウ / ウメ / ニホンスモモ / アーモンド |
Research Abstract |
本年度は、Prunus属果樹類のアグロバクテリウム法による形質転換系を確立し,昨年度と一昨年度の両年の研究で得られたS-RNaseのcDNAをアンチセンス方向で組み込むことで自家和合の形質転換個体を作出するために,まずはカンカオウトウを材料に種々の検討を行った.種々のサイトカイニンとオーキシンを添加した培地に,未受精の胚珠組織や未熟胚組織,あるいは成熟胚の子葉切片を置床し,培養を行ったが,カルスの形成は認められるものの不定胚や不定芽などの器官形成は全く認められなかった.そこで,培養シュートから葉片を作製し,種々のサイトカイニンとオーキシンを添加した培地上で培養を行ったが,前記の胚組織の培養と同じく,カルスの形成は認められるものの,不定胚や不定芽などの器官形成は全く認められなかった.このように,本年度は再生系の確立はできなかったが,本年度に得られたデータを吟味し,来年度も引き続いて,培地条件等をさらに検討して,再生系の確立を目指す予定にしている.なお,本年度も、培養の実験に加えて,昨年度と同様にクローニング実験も行い,オウトウのS-RNase遺伝子の部分配列やサンカオウトウやニホンスモモのS-RNaseのcDNAを単離することに成功した.オウトウのS-RNase遺伝子の部分配列をクローニングし,その塩基配列を明らかにしたことで,昨年度までの実験で確立していたPCRによるS遺伝子型の判別よりも,さらに精度の高いPCR/RFLPによるS遺伝子型の判別法を確立できた.この手法を適用することで, オウトウ新品種のS遺伝子型の判別を行うことに成功した.
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[Publications] 田尾 龍太郎: "Molecular typing of S-alleles through identification characterization and cDHA cloning for S-Rnases in sweet cherry"Journal of American Society for Horticultural Science. 124・3. 224-233 (1999)
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[Publications] 山根 久代: "Identification and cDNA clonling for S-Rnases in self-incompatible Japanese plum (Prunus salicina Lindl cv Sordur)"Plant Biotechnology. 16・5. 389-396 (1999)
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[Publications] 山根 久代: "Determining S-genotypes of two sweet cherry (Prunus ariu-L.) cultivers 'Takasago (Rockport Bigarrean)' and 'Hinode (Early Purple)'"Journal of Japanese Society for Horticultural Science. 69・1. 29-34 (2000)
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[Publications] 田尾 龍太郎: "Cloning and nucleotide sequences of cDNAs encoding S1-, S3-, S4-, and S6-Rnases from sweet cherry"(PGR99-121) Plant Physiology. 120. 1207-1207 (1999)
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[Publications] 田尾 龍太郎: "Cloning of genomic DNA sequences encoding S1-, S3-, S4-, and S6-Rnases from sweet cherry"(PGR99-166) Plant Physiology. 121. 1057-1057 (1999)
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[Publications] 田尾 龍太郎: "Molecular markers for self-compatibility in Japanese apricot (Prunus mume)"Hort Science. (印刷中).