1998 Fiscal Year Annual Research Report
食細胞NADPHオキシダーゼの活性化機構とその異常
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09470045
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
竹重 公一朗 九州大学, 医学部, 教授 (10037450)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
栗林 太 九州大学, 医学部, 助手 (60251443)
住本 英樹 九州大学, 医学部, 教授 (30179303)
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| Keywords | 好中球 / 活性酸素 / NADPHオキシダーゼ / タンパク・タンパク相互作用 / シグナル伝達 |
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| Research Abstract |
食細胞NADPHオキシダーゼは、食作用時に活性化され、スーパーオキシドを生成する。その活性化には、細胞質に存在するp47,p67、および低分子量Gタンパク質であるRacが細胞膜に移行して、酵素本体である膜貫通のシトクロムb_<558>と複合体を形成することが必要である。また、p40は食細胞において常にp67と会合しており、p47とも相互作用することが知られており、オキシダーゼ活性化の調節因子であると考えられている。
今年度は、オキシダーゼ活性化機構に関して、次のような成果を得た。
1. マウスp40とマウスp67のcDNAをクローニングし、マウスp40,p67,p47の機能およびタンパク質問相互作用を検討した。その結果、p67,p47,p40は、マウスとヒトの間で構造的、機能的によく保存されていること、またp40は海馬や小脳の神経細胞にも発現していることを見出した。
2. オキシダーゼの無細胞系での活性化には、アラキドン酸のような陰イオン性両親媒性物質が必要である。今回アラキドン酸を加えることなくオキシダーゼの活性化を起こすことができた。すなわち、p47のN末側SH3領域がunmaskされた状態となっている変異体は、シトクロムb_<558>のp22サブユニットへの結合とオキシダーゼの活性化をひき起こした。これらの結果は、p47のSH3領域が、活性化制御において重要な分子内相互作用をしていることを示している。このことはすでに我々が提出した活性化モデルを支持するものである。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Hata K.: "Roles for proline-rich regions of p47phox and p67phox in the phagocyte NADPH oxidase activation in vitro." Biochem.Biophys.Res.Commun.273. 4232-4236 (1998)
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[Publications] Mizuki K.: "Functional modules and expression of mouse p40phox and p67phox,SH3-domain- containing proteins involved in the phagocyte NADPH oxidase complex" Eur.J.Biochem.251. 573-582 (1998)
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[Publications] Nakamura R.: "The PC motif:a novel and evolutionarily conserved sequence invoived in interaction beween p40_<phox>andp67_<phox>,SH3 domain-containing cytosolic factors of the phagocyte NADPH oxidase" Eur.J.Biochem.251. 583-589 (1998)
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[Publications] Kikuta Y.: "Purification and characterization of recombinant human nertrophil lerkotriene B_4 ω-hydroxxylase(Cytochrome P450 4F3)" Arch.Biochem.Biophys.355. 201-205 (1998)
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[Publications] Kang D.: "Mitochondria in aging,disease and cancer:Introkuction," Mitochondrial DNA Mutations in Aging,Disease and Cancer(ed.K..K.Singh)R.G.Landes company,Austin. 1-15 (1998)
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[Publications] izuhara K.: "Association of the interleukin-4 receptorα chain with p47^<phox>,an activator of the phagocyte NADPH oxidase." Clinical and Experimental Immunology. (in press).
