1997 Fiscal Year Annual Research Report
DNA型および血液型を利用した、性犯罪事件の容疑者の推定に関する法医学的研究
Project/Area Number |
09470122
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Research Institution | Gunma University |
Principal Investigator |
安田 年博 群馬大学, 医学部, 助教授 (80175645)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
細見 修 群馬大学, 医学部, 助手 (30134274)
中島 たみ子 群馬大学, 医学部, 助手 (40008561)
竹下 治男 群馬大学, 医学部, 講師 (90292599)
岸 紘一郎 群馬大学, 医学部, 教授 (30169841)
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Keywords | 個人識別 / 精液 / デオキシリボ核酸分解酵素 / cDNA構造 / 分子生物学 / 遺伝的多型 / 血液型 |
Research Abstract |
精液(斑)などの法医学的試料からの個人識別能を向上させるためには新しい精液からの個人識別マーカーの発見・導入が必須である。本研究では、我々が発見した精液中の遺伝マーカーであるデオキシリボ核酸分解酵素II(DNase II)に関してDNA試料からの型判定法確立のため、ヒトDNase IIcDNA構造の解明を目的とした。Rapid amplification of cDNA end法を用いヒト甲状腺RNAよりDNase IIをコードする完全長cDNAが得られた。全長1593bpのDNase IIcDNAには、16アミノ酸残基のsignal peptide部分、91アミノ酸残基のpropeptide部分および253アミノ酸残基のmature protein部分より構成される全長360アミノ酸残基のポリペプチドをコードする1080bpのopen reading frameが含まれていた。この構造に基づき大腸菌を利用した発現系も確立できた。本研究成果より、DNase IIはheterodimeric構造を有することが確認された。このcDNA構造はリソゾーム酵素であるcathepsin superfamilyのそれに類似していた。さらに、ヒト各臓器についてDNase II活性定量およびRT-PCR分析より、DNase II遺伝子の発現は特定臓器に遍在していることが明らかとなった。ヒトDNase II cDNA構造は、脊椎動物DNase IIについて初めて報告されたcDNA構造である。現在、ヒトDNase IIの遺伝子的多型性の分子論的基盤を解明すべく研究を継続している。有用な個人識別マーカーとして活用されているデオキシリボ核酸分解酵素I(DNase I)型に関して、新しい対立遺伝子や多型部位を発見した。この結果はDNase Iの個人識別能のより一層の向上をもたらした。
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[Publications] Yasuda,T.: "Purification of deoxyribonuclease I(DNase I)using two-step chromatography" Analytical Biochemistry. 245(2). 255-257 (1997)
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[Publications] Aoyama,M.: "DYS19 marker in Japanese populations" International Journal of Legal Medicine. 110(2). 112-113 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Populations studies of human deoxyribonuclease I polymorphism" Human Heredity. 47(3). 121-124 (1997)
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[Publications] Takeshita,H.: "Mouse deoxyribonuclease I(DNase I)" Biochemistry and Molecular Biology International. 42(1). 65-75 (1997)
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[Publications] Iida,R.: "The fifth allele of the human deoxyribonuclease I(DNase I)polymorphism" Electrophoresis. 18(11). 1936-1939 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Rabbit deoxyribonuclease I(DNase I)" Biochemical Journal. 325(2). 465-473 (1997)
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[Publications] Takeshita,H.: "The STR loci HumTPO and HumLPL:population genetic data in eight populations" International Journal of Legal Medicine. 110(6). 331-333 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Activity measurement for deoxyribonucleases I and II with picogram sensitivity based on DNA/SYBR Green I fluorescence" Analytical Biochemistry. 255(2). 274-276 (1998)
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[Publications] Hosomi,O.: "Simple purification method of the antiphospholipid antibody from normal human plasma" Experimental and Clinical Immunogenetics. 14(4). 281-285 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Genetic polymorphisms detected in human urine: their application to forensic individualization" The Japanese Journal of Legal Medicine. 51(6). 407-416 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Molecular cloning of the cDNA encoding human deoxyribonuclease II" The Journal of Biological Chemistry. 273(5). 2610-2616 (1998)
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[Publications] Tsutsumi,S.: "Phenotype 2 of deoxyribonuclease I may be used as a risk factor of gastric cancer" Cancer. (in press).
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[Publications] Takeshita,H.: "Detection of the two short tandem repeat loci(HumTPO and HumLPL)in Japanese populations using discontinuous polyacrylamide gel electrophoresis" The Japanese Journal of Legal Medicine. (in press).
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[Publications] Nakajima,T.: "Two novel screening methods for selecting,monoclonal antibodies which specifically inhibit DNase I enzyme activity" Immunological Investigations. (in press).
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[Publications] Yasuda,T.: "Chromosomal locallization of a human deoxyribonuclease II gene(DNASE2)to 19p13.2-p13.1 using both the polymerase chain reaction and fluorescence in situ hybridization analysis" Biochemical and Biophysical Research communications. (in press).
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[Publications] Yasuda,T.: "Anthropological application of genetic polymorphisms detected in human urine: a review of Japanese studies" Rivista di Antropologia. (in press).
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[Publications] 灘野 大太: "アポトーシスとエンドヌクレアーゼとの関連性" 臨床薬理の進歩. No.18. 105-110 (1997)
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[Publications] 岸 紘一郎: "核酸分解酵素DNase Iの遺伝的多型の発見" 医学のあゆみ. 180(10). 658-659 (1997)
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[Publications] 灘野大太: "ヒトのDNase IおよびIIとアポトーシスとの関連性:ヒトDNase I遺伝子構造とpolymorphic siteの同定" 総合健康推進財団 研究報告書(第11)平成6年度助成事業. 111-119 (1997)
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[Publications] 安田年博: "核酸分解酵素の遺伝的多型を利用した膵肝疾患罹患のハイリスクグループ特定に関する予防医学的研究" 膵臓病研究財団第3回研究報告書. No.3. 1-4 (1997)
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[Publications] 飯田礼子: "PCR-SSCP法によってヒトdeoxyribonuclease I遺伝子の第7イントロン内に検出される新しい多型部位" DNA多型. Vol.5. 203-206 (1997)