1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09470153
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
川上 秀史 広島大学, 医学部, 助手 (70253060)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
郡山 達男 広島大学, 医学部附属病院, 講師 (80195693)
山村 安弘 広島大学, 医学部, 教授 (10106388)
中村 重信 広島大学, 医学部, 教授 (30026843)
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| Keywords | パーキンソン病 / ドパミントランスポーター / 遺伝子 |
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| Research Abstract |
パーキンソン病の遺伝的要因を明らかにするため、MPP^+の取り込み経路であるドパミントランスポーター(DAT)を対象として解析した。既知のDATcDNAの塩基配列よりプライマーを決定しPCR法を用いて、ヒト黒質cDNAより、DATcDNAを単離した。それをプローブにして、300万プラークからなるヒト遺伝子ライブラリーをスクリーニングし、ヒトDAT遺伝子を17個のラムダファージクローンとして単離した。サザンブロットおよび塩基配列を決定することにより、その全エクソン-イントロン構造を決定した。その結果、ヒトDAT遺伝子は全長50Kb以上にわたり、1つの非蛋白翻訳領域を含むエクソンを含めて15個のエクソンからなることを明らかにした。これは、これは、他のアミントランスポーター遺伝子と構造的に相同であり、1次構造のみならず、遺伝子構造のうえでも同一の祖先遺伝子から進化したことを示すものである。さらに、各エクソンに対して、エクソン-イントロン境界を含めて増幅できるようにプライマーを設定し、PCR法を用いて、15全てのエクソンを増幅できる条件を決定した。またパーキンソン病患者を臨床的に評価し、インフォームドコンセントを得た後、50人より末梢血を採血し、高分子DNAを抽出した。今後、パーキンソン病患者DNAよりDAT遺伝子各エクソンを増幅し、直接塩基配列決定法やSSCP法を用いて、多型を見出し、パーキンソン病患者での頻度を検討する予定である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Kawarai T: "Structure and organization of the gene encoding human dopamine transpong" Gene. 195・1. 11-18 (1997)
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[Publications] Saida K: "Coagulation and vascular abnornalities in Crow-Fukasesndrol" Muscle and Nerve. 20・4. 486-492 (1997)
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[Publications] Kurohara K: "Homozygosity for an allele carrying intermediate CAG repeats in the dentatorubular-pallidoluysian atrophy (DRPLA) gene results in spastic paraplegia" Neurology. 48・4. 1087-1090 (1997)
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[Publications] Matsuyama Z: "Molecular features of the CAG repeats of spinocerebellar ataxia 6 (SCA6)" Human Molecular Genetics. 6・8. 1283-1287 (1997)
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[Publications] Kawarai T: "A new mitochondrial DNA mutation associated with mitochondrial myopathy : tRNALeu (UUR) 3254C-to-G" Neurolosy. 49・2. 598-600 (1997)
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[Publications] Maruyamn H: "CAG repeat length and disease duration in Machado-Joseph disease:A new clinical classification" J Neurologial Science. 152・2. 166-171 (1997)
