1997 Fiscal Year Annual Research Report

一酸化窒素(NO)分泌制御による動脈硬化病変退縮の検討-NO合成酵素の遺伝子導入による動脈硬化治療-

Research Project

Project/Area Number	09470166
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	井口昭久名古屋大学, 医学部, 教授 (20109763)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐久間一郎北海道大学, 医学部, 助手 (40260393) 渡辺泰男名古屋大学, 医学部, 助手 (10273228) 林登志雄名古屋大学, 医学部, 医員
Keywords	一酸化窒素 / 動脈硬化 / 動脈硬化退縮 / 遺伝子導入 / 血管内超音波 / 一酸化窒素合成酵素 / 構造機能解析
Research Abstract	1) eNOS, iNOSの遺伝子導入今年度は、in vivoでのNOS遺伝子導入のための予備実験として、培養牛胎児平滑筋及び胸部大動脈標本にeNOS, iNOSのベクターを導入し、mRNA量、蛋白量、活性を測定した。 2) eNOS, iNOSそれぞれに構造機能解析を用いてcalmodulin結合部位を有しないミュータントを作製し、2量体形成時に活性を調節する手技を確立した。 eNOS, iNOSのcalmodulin binding siteに着目しこれを欠失したミュータントを構造機能解析的に形成し,2量体形成時に,ホモ(calmodulin結合能欠失,不活型ホモ)又は活性を持つ野生型とのヘテロ型(不活型ヘテロ)をワタナベらの方法により作製した。 3)進行動脈硬化病変を,病変の個体差をなくすために、血管内超音波を用い評価を行った。 1%コレステロール食負荷家兎及び普通食負荷同家兎を用い、飼育時に腹部大動脈及び大腿動脈をバルーン擦過しさらなる内膜肥厚をはかる。本年は雄性群を用い、バルーン擦過12週後、血清脂質測定後、血管内超音波検査を施行した。大腿動脈よりガイドワイヤー下に2.9Fr血管内超音波用カテーテルを挿入し動脈硬化病変を検索した。 4)病態評価を,細胞薬理、分子生物学,超微細免疫形態学から行い、退縮のキ-ポイントを探った。 NO関連血管反応性,NO分泌能,NO合成酵素活性,転写レベルの調節機構と,免疫電顕による形態評価を行った。転写レベルの調節機構は、血管壁をhomogenateしtotal RNAを抽出、RT-PCR法により、eNOS, iNOSそれぞれのmRNAを測定することから、開始した。免疫電顕により、高脂肪食負荷動脈硬化家兎大動脈病変内のマクロファージ系細胞のミトコンドリアにiNOSの特異的発現を認めた。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "Inducible Nitric Oxide Synthase is expressed in atherosclerotic lesions of cholesterol-fed rabbits." Atherosclerosis. 128. 39-46 (1997)
[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "The β-adrenoreceptor antagonist, nipradiol, preserves the endothelial nitric oxide response in atherosclerotic vessels of rabbit." Life Sciences. 61. 1379-1387 (1997)
[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "The role of estrogen in atherosclerosis ; Estrogen increases endothelial nitric oxide and inhibits inducible nitiric oxide by a receptor mediated system." Gerontology. 43. 24-34 (1997)
[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "Physiological concentration of 17β-estradiol inhibits the synthesis of inducible nitric oxide synthase in macrophages." J Cardiovascular Pharmacology. (in press). (1998)
[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "Nipradilol ; β-adrenergic blocker with NO releasing activity" J Cardiovascular Drug Review. (in press). (1998)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

一酸化窒素(NO)分泌制御による動脈硬化病変退縮の検討-NO合成酵素の遺伝子導入による動脈硬化治療-

Principal Investigator

井口 昭久 名古屋大学, 医学部, 教授 (20109763)

Research Products

[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "Inducible Nitric Oxide Synthase is expressed in atherosclerotic lesions of cholesterol-fed rabbits." Atherosclerosis. 128. 39-46 (1997)

[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "The β-adrenoreceptor antagonist, nipradiol, preserves the endothelial nitric oxide response in atherosclerotic vessels of rabbit." Life Sciences. 61. 1379-1387 (1997)

[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "The role of estrogen in atherosclerosis ; Estrogen increases endothelial nitric oxide and inhibits inducible nitiric oxide by a receptor mediated system." Gerontology. 43. 24-34 (1997)

[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "Physiological concentration of 17β-estradiol inhibits the synthesis of inducible nitric oxide synthase in macrophages." J Cardiovascular Pharmacology. (in press). (1998)

[Publications] Hayashi T, Iguchi A et al: "Nipradilol ; β-adrenergic blocker with NO releasing activity" J Cardiovascular Drug Review. (in press). (1998)

井口昭久名古屋大学, 医学部, 教授 (20109763)