1997 Fiscal Year Annual Research Report

糖尿病発症に関与する膵β細胞のグルコース代謝シグナル伝達とその応答障害の解析

Research Project

Project/Area Number	09470219
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	清野裕京都大学, 医学研究科, 教授 (40030986)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	久保田章京都大学, 医学研究科, 医員山田祐一郎京都大学, 医学研究科, 助手 (60283610)
Keywords	CRE / カルシウムチャネル / calmodulin-dependent protein kinase IV / PCR-SSCP / インスリン遺伝子 / グルコース応答性 / CRE-BPl
Research Abstract	電位依存性カルシウムチャネルαサブユニット(α lD)遺伝子変異の有無を49個の全エクソンについてPCR-SSCP法で解析した。その結果、新たに第42エクソンにグルタミン酸(GAA)が欠失する変異を同定した。その変異は、918人のNIDDM患者のうち、3人で検出された。また、第1エクソンのメチオニン(ATG)挿入は、918人中2人で検出できた。 CRE(cyclic AMP-response element)に結合する転写因子であるCRE-BPlの発現を免疫染色法で認めた。そこで、インスリン遺伝子グルコース反応性における、CREとCRE-BPlの役割について、初代培養ラットラ氏島に遺伝子導入する系を確立し検討した。その結果、インスリン遺伝子に同定された4ヵ所のCREを一部変異させたところ、グルコース応答性は減弱した。また、CRE-BPlの転写活性化領域をGAL4のDNA結合領域と融合した蛋白を発現させたところ、その転写活性はグルコースにより誘導された。したがって、グルコースによるインスリン遺伝子発現亢進には、CRE-BPlの活性化が関与することが示された。また、calmodulin-dependent protein kinase IVの共発現により、CRE-BP1の転写活性能は増強された。これらの結果は、グルコースによるインスリン遺伝子発現増強には、グルコースによる細胞内カルシウム濃度増加がcalmodulin-dependent protein kinase IVを活性化しCRE-BPlをリン酸化し、インスリン遺伝子のCREに作用することが重要であることが示唆された。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] E.Mukai et al.: "Metabolic inhibition impaires ATP-sensitive K^+ channel block by sulfonylurea in pancreatic β cells." Am J Physiol. (in press).
[Publications] S.Fujimoto et al.: "The novel insulinotropic mechanism of pimobendan : direct enhancement of the exocytotic process of insulin secretory granules by increased Ca2+sensitivity in βcells." Endocrinology. (in press).
[Publications] N.Mizuno et al.: "Altered Bcl-2 and Bax expression and intracellular Ca^<2+> signaling in apoptosis of pancreatic β-cells and the impairment of glucose-inducedinsulin secretion." Endocrinology. (in press).
[Publications] M.Horie et al.: "Insulin secretion and its modulation by antiarrhythmic and sulfonylurea drugs." Cardiovascular Research. 34. 69-72 (1997)
[Publications] T.Miura et al.: "A comparative study of high-fat diet containing fish oil or lard on blood glucose in genetically diabetic (db/db) mice." J Nurt Sci Vitaminol. 43. 225-231 (1997)
[Publications] A.Kubota et al.: "Identification of two missense mutations in the GIP receptor gene,a functional study and association analysis with NIDDM ; no evidence of association with Japanese NIDDM subjects." Diabetes. 45(12). 1701-1705 (1996)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

糖尿病発症に関与する膵β細胞のグルコース代謝シグナル伝達とその応答障害の解析

Principal Investigator

清野 裕 京都大学, 医学研究科, 教授 (40030986)

Research Products

[Publications] E.Mukai et al.: "Metabolic inhibition impaires ATP-sensitive K^+ channel block by sulfonylurea in pancreatic β cells." Am J Physiol. (in press).

[Publications] S.Fujimoto et al.: "The novel insulinotropic mechanism of pimobendan : direct enhancement of the exocytotic process of insulin secretory granules by increased Ca2+sensitivity in βcells." Endocrinology. (in press).

[Publications] N.Mizuno et al.: "Altered Bcl-2 and Bax expression and intracellular Ca^<2+> signaling in apoptosis of pancreatic β-cells and the impairment of glucose-inducedinsulin secretion." Endocrinology. (in press).

[Publications] M.Horie et al.: "Insulin secretion and its modulation by antiarrhythmic and sulfonylurea drugs." Cardiovascular Research. 34. 69-72 (1997)

[Publications] T.Miura et al.: "A comparative study of high-fat diet containing fish oil or lard on blood glucose in genetically diabetic (db/db) mice." J Nurt Sci Vitaminol. 43. 225-231 (1997)

[Publications] A.Kubota et al.: "Identification of two missense mutations in the GIP receptor gene,a functional study and association analysis with NIDDM ; no evidence of association with Japanese NIDDM subjects." Diabetes. 45(12). 1701-1705 (1996)

清野裕京都大学, 医学研究科, 教授 (40030986)