1998 Fiscal Year Annual Research Report

血栓性素因の分子細胞生物学的解析と遺伝子治療の基礎的検討

Research Project

Project/Area Number	09470228
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	齋藤英彦名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	唐渡雅行名古屋大学, 医学部, 医員小嶋哲人名古屋大学, 医学部, 助手 (40161913) 高松純樹名古屋大学, 医学部, 助教授 (80221365)
Keywords	血栓性素因 / プロテインS欠乏症 / 遺伝子異常 / nonsense mutation / 血小板mRNA / exon skipping / alternative splicing
Research Abstract	特発性血栓症の基礎疾患の一つであり、pseudogeneの存在のため遺伝子解析が困難とされる血栓性素因プロテインS(PS)欠乏症において、新たな遺伝子変異を同定しその欠乏症に至る分子病態について検討した。Type I PS欠乏症患者ならびにその家族よりinformed consentを得たのち、末梢血液より血漿、血小板mRNA、白血球DNAサンプルを採取し、それぞれPSの活性・抗原値を測定するとともにPCRを用いて患者のPS遺伝子を解析して多結果、Sser62(TC__-A)->Stop(TG__-A)の遺伝子異常を同定した。血小板中に存在するPS mRNAをPCRにて解析したところ、この変異PS mRNAではexon 4のskippingが生じ、かつその発現量は正常mRNAに比べて激減していた。exon 4 skippingは87塩基のin-frame deletionを生じ、29個のアミノ酸が欠失すると予想された。本患者のPS欠乏症のDNAレベルの解析からはnonsense mutationにより異常PSが作られることがその発症病態と推察されたが、PSmRNA解析の結果からこのnonsense mutationがPSmRNAにalternative splicingによるexon skippingを誘導しその発現量が極端に低下すること、およびexon 4 Skippingにより29個のアミノ酸を欠失した異常PSが合成されることが本患者におけType I PS欠乏症の原因であると考えられた。すなわち、本PS欠乏症はPS遺伝子のnonsense mutationそのものが原因ではなく、これがexon Skippingを誘導しかつmRNAの発現量を低下させることがその分子病態であると考えられた。これは遺伝性疾患の分子病態解析においてDNAだけでなくmRNAレベルの解析の重要性を示唆する症例と思われる。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Yamazaki,T.,Katsumi,A.,Saito,H.,et al.: "Two distinct novel splice site mutations in a compound heterozygous patient with protein S deficiency." Thromb Haemost. 77. 14-20 (1997)
[Publications] Nagase,H.,Kitazato,K.T.,Saito,H.,et al.: "Antithrombin III-independent effect of depolymerized holothurian glycosaminoglycan(DHG)on acute thromboembolism in mice." Thromb Haemost. 77. 399-402 (1997)
[Publications] Gandrille,S.,Borgel,D.,Saito,H.,et al.: "Protein S Deficiency:A Database of Mutations." Thromb Haemost. 77. 1201-1214 (1997)
[Publications] Izumi,T.,Nagaoka,U.,Saito,H.,et al.: "Novel deletion and insertion mutations cause splicing defects,leading to severe reduction in mRNA levels of the A subunit in severe factor XIII deficiency." Thromb Haemost. 79. 479-485 (1998)
[Publications] Katsumi,A.,Kojima,T.,Saito,H.,et al.: "The Carboxyl-Terminal Region of Protein C is Essential for Its Secretion." Blood. 91. 3784-3791 (1998)
[Publications] Honda,S.,Tomiyama,Y.,Saito,H.,A.et al.: "A Two-Amino Acid Insertion in the Cys 146-Cys167 Loop of the a IIb Subunit Is Associated with a Variant of Glanzmann Thrombasthenia.Critical Role of Asp 163 in Ligand Binding." J Cin Invest. 102. 1183-1192 (1998)
[Publications] Saito,H.: "Megakaryocytic cell lines. In Bailliere's Clinical Haematology:Megakaryocytes and platelet disorders." Caen J.P.and Han Z-C.etits. Bailliere Tindall., 47-63 (1997)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

血栓性素因の分子細胞生物学的解析と遺伝子治療の基礎的検討

Principal Investigator

齋藤 英彦 名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)

Research Products

[Publications] Yamazaki,T.,Katsumi,A.,Saito,H.,et al.: "Two distinct novel splice site mutations in a compound heterozygous patient with protein S deficiency." Thromb Haemost. 77. 14-20 (1997)

[Publications] Nagase,H.,Kitazato,K.T.,Saito,H.,et al.: "Antithrombin III-independent effect of depolymerized holothurian glycosaminoglycan(DHG)on acute thromboembolism in mice." Thromb Haemost. 77. 399-402 (1997)

[Publications] Gandrille,S.,Borgel,D.,Saito,H.,et al.: "Protein S Deficiency:A Database of Mutations." Thromb Haemost. 77. 1201-1214 (1997)

[Publications] Izumi,T.,Nagaoka,U.,Saito,H.,et al.: "Novel deletion and insertion mutations cause splicing defects,leading to severe reduction in mRNA levels of the A subunit in severe factor XIII deficiency." Thromb Haemost. 79. 479-485 (1998)

[Publications] Katsumi,A.,Kojima,T.,Saito,H.,et al.: "The Carboxyl-Terminal Region of Protein C is Essential for Its Secretion." Blood. 91. 3784-3791 (1998)

[Publications] Honda,S.,Tomiyama,Y.,Saito,H.,A.et al.: "A Two-Amino Acid Insertion in the Cys 146-Cys167 Loop of the a IIb Subunit Is Associated with a Variant of Glanzmann Thrombasthenia.Critical Role of Asp 163 in Ligand Binding." J Cin Invest. 102. 1183-1192 (1998)

[Publications] Saito,H.: "Megakaryocytic cell lines. In Bailliere's Clinical Haematology:Megakaryocytes and platelet disorders." Caen J.P.and Han Z-C.etits. Bailliere Tindall., 47-63 (1997)

齋藤英彦名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)