1997 Fiscal Year Annual Research Report

造血シグナル間のクロストークの解明とその分子機構

Research Project

Project/Area Number	09470232
Research Institution	Kyoto Prefectural University of Medicine
Principal Investigator	薗田精昭京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60206688)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	木村貴文京都府立医科大学, 医学部, 助手 (30275193) 奥田司京都府立医科大学, 医学部, 講師 (30291587) 村上章京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (60210001)
Keywords	造血シグナル / クロストーク / 造血幹細胞 / gp130 / IL-6 / アンチセンスDNA / チロシンキナーゼ / 転写因子
Research Abstract	本研究では、はじめにセルソーターを用いて骨髄、末梢血、臍帯血由来の幹細胞を高度に純化し、各幹細胞分画の表面抗原、サイトカイン受容体、さらにいgp130の発現レベルについてマルチカラー解析を行なった。その結果、gp130はほぼubiquitousに発現していたが、c-kit,fit3,IL-3R、IL-6R,commonβなどの発現レベルには幹細胞の起源により大きな差が認められた。そこで末梢血、臍帯血よりCD34^+IL-6R^<+or->細胞を分離し、IL-6あるいはsolubleIL-6 receptor(sIL-6R)を用いてgp130のシグナルを活性化した。これまでの検討により、gp130を介するシグナル単独では幹細胞に対して有意な作用を示さないが、これらの3つのシグナルを同時に活性化することにより劇的な強調作用が認められ、G-CSF,Epo,TPOなどの細胞系列特異的因子非依存性に3系統の成熟血球を誘導できること見い出した。以上の実験より、(1)IL-3Rを介するシグナルが幹細胞の生存や初期の増殖に必須であること、(2)SCFはIL-3の存在下における幹細胞の増殖を促進すること、(3)gp130を介するシグナルは主に成熟因子として作用することなどが明らかとなった。さらに、commonβを介するシグナルの活性化にGM-CSF,IL-5を用いたところ、IL-3とは量的にも質的にも異なる結果が得られた。このことは標的細胞上の受容体の発現パターンだけでなく、細胞内のシグナル伝達やクロストークが一様でないことを意味している。そこでG-CSF,Epo,TPOなどの細胞系列特異的因子のシグナル伝達に関与するJAK2,およびその下流のSTAT5に注目し、各々のアンチセンスDNA分子を合成し、シグナルの協調作用に対する影響について詳細に検討している。今後、PU.1,GATA-1,NF-E2などの細胞系列特異的な転写因子についても検討し、JAK-STAT系を介するシグナル伝達とMAPキナーゼカスケードとのクロスストークを明らかにするとともに、キ-シグナルの探索を行う予定である。

Research Products
(11 results)

All Other

All Publications (11 results)

[Publications] Sakabe H, et al.: "Human cord blood-derived primitive progenitors are enriched in CD34+c-kit- cells" Leukemia. (in press). (1998)
[Publications] Sakabe H, et al.: "Haematopoietic action of flt3 ligand on cord blood-derived CD34-positive cells expressing different---" Eur J Haematol. (in press). (1998)
[Publications] Kimura T, et al.: "Simultaneous activation of signals though gp130,c-kit,and interleukin-3 receptor promotes a trilinea" Blood. 90(12). 4767-4778 (1997)
[Publications] Tanimukai S, et al.: "Recombinant human c-Mpl ligand(thrombopoietin)not only acts on megakaryocyte progenitors,but also---" Exp Hematol. 25. 1025-1033 (1997)
[Publications] Sonoda Y, et al.: "Human flt3 ligand acts on myeloid as well as multipotential progenitors derived from purified---" Eur J Haematol. 58. 257-264 (1997)
[Publications] Sonoda Y, et al.: "Action of human interleukin-4 and stem cell factor on erythroid and mixed colony formation by---" Br J hamatol. 96. 781-789 (1997)
[Publications] Ohmizono Y, et al.: "Thrombopoietin augments ex vivo expansion of human cord blood-derived hematopoietic progenitors---" Leukemia. 11. 524-530 (1997)
[Publications] Sakabe H, et al.: "Functional differences between subpopulations of mobilized peripheral blood-derived CD34+ cells---" Stem Cells. 15. 73-81 (1997)
[Publications] Sonoda Y, et al.: "Characterization of peripheral blood stem cells" Jpn J Apheresis. 16(1). 44-49 (1997)
[Publications] Inoue K, et al.: "Aberrant overexpression of the Wilms tumor gene(WT1)in human leukemia" Blood. 89(4). 1405-1412 (1997)
[Publications] Yokota S, et al.: "Internal tandem duplication of the flt3 gene is preferntially seen in acute myeloid leukemia---" Leukemia. 11. 1605-1609 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

造血シグナル間のクロストークの解明とその分子機構

Principal Investigator

薗田 精昭 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60206688)

Research Products

[Publications] Sakabe H, et al.: "Human cord blood-derived primitive progenitors are enriched in CD34+c-kit- cells" Leukemia. (in press). (1998)

[Publications] Sakabe H, et al.: "Haematopoietic action of flt3 ligand on cord blood-derived CD34-positive cells expressing different---" Eur J Haematol. (in press). (1998)

[Publications] Kimura T, et al.: "Simultaneous activation of signals though gp130,c-kit,and interleukin-3 receptor promotes a trilinea" Blood. 90(12). 4767-4778 (1997)

[Publications] Tanimukai S, et al.: "Recombinant human c-Mpl ligand(thrombopoietin)not only acts on megakaryocyte progenitors,but also---" Exp Hematol. 25. 1025-1033 (1997)

[Publications] Sonoda Y, et al.: "Human flt3 ligand acts on myeloid as well as multipotential progenitors derived from purified---" Eur J Haematol. 58. 257-264 (1997)

[Publications] Sonoda Y, et al.: "Action of human interleukin-4 and stem cell factor on erythroid and mixed colony formation by---" Br J hamatol. 96. 781-789 (1997)

[Publications] Ohmizono Y, et al.: "Thrombopoietin augments ex vivo expansion of human cord blood-derived hematopoietic progenitors---" Leukemia. 11. 524-530 (1997)

[Publications] Sakabe H, et al.: "Functional differences between subpopulations of mobilized peripheral blood-derived CD34+ cells---" Stem Cells. 15. 73-81 (1997)

[Publications] Sonoda Y, et al.: "Characterization of peripheral blood stem cells" Jpn J Apheresis. 16(1). 44-49 (1997)

[Publications] Inoue K, et al.: "Aberrant overexpression of the Wilms tumor gene(WT1)in human leukemia" Blood. 89(4). 1405-1412 (1997)

[Publications] Yokota S, et al.: "Internal tandem duplication of the flt3 gene is preferntially seen in acute myeloid leukemia---" Leukemia. 11. 1605-1609 (1997)

薗田精昭京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60206688)