1998 Fiscal Year Annual Research Report
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09470320
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| Research Institution | KYOTO PREFECTURAL UNIVERSITY OF MEDICINE |
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Principal Investigator |
久保 俊一 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (20178031)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
滝川 正春 岡山大学, 歯学部, 教授 (20112063)
澤田 恒平 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (40264767)
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| Keywords | 遺伝子治療 / アデノウイルスベクター / モルモット / in vivo / drug delivery system / TGF-β1 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、関節疾患に対する遺伝子治療の可能性を考える上で、アデノウイルスベクターを用いたdirect遺伝子導入法が、in vivoにおいて可能であるかどうかを明らかにすることである。変形性関節症の自然発症モデルであるモルモットの膝関節内にβ-galactosidase(β-gal)またはtransforming growth factor(TGF)-β1遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターを直接投与した。関節内における導入遺伝子の発現を検討するために5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside(X-gal)による染色を行った。また関節内および関節外臓器における遺伝子発現を調べるためにreverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)を行った。さらにTGF-β1を関節内に遺伝子導入後、関節液中に移行したTGF-β1濃度をenzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)で測定した。
関節内においてほぼすべての範囲の滑膜組織と、変性した軟骨組織の表層の軟骨細胞においてLacZの発現を認めた。関節外臓器では導入遺伝子の発現は認めずアデノウイルスベクターの関節内投与による全身主要臓器に対する影響は少ないことが判明した。またTGF-β1を関節内に遺伝子導入した場合、関節液中のTGF-β1濃度は対照側と比べ2週間有意に高値を示した。
これらの結果から、アデノウイルスベクターを用いたin vivo遺伝子導入法により、他臓器に影響を及ぼすことなく関節腔内に直接遺伝子導入が可能であり、関節疾患に対する新しいdrug delivery systemとして応用が可能であると考える。
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[Publications] Arai,Y.: "Adenovirus vector-mediated gene transduction to chondrocytes:In vitro evaluation of therapeutic efficacy of transforming growth factor-β 1 and heat shock protein 70 gene transduction." The Journal of Rheumatology. 24(9). 1787-1795 (1997)
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[Publications] Ikeda,T.: "Adenovirus mediated gene delivery to the joints of guinea pigs." The Journal of Rheumatology. 25(9). 1666-1673 (1998)
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[Publications] 久保 俊一: "アデノウイルスベクターによる軟骨細胞に対する遺伝子導入法の検討" Academia. 171. 16-22 (1997)
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[Publications] 久保 俊一: "関節軟骨修復に対する遺伝子治療" 骨・関節・靱帯. 10(11). 1339-1347 (1997)
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[Publications] 久保 俊一: "軟骨修復とサイトカイン -遺伝子導入を用いて-" 整形・災害外科. 41(1). 37-44 (1998)
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[Publications] 久保 俊一: "アデノウイルスベクターを用いた遺伝子治療" 整形・災害外科. 41(9). 1087-1091 (1998)
