1998 Fiscal Year Annual Research Report
婦人科癌におけるテロメラーゼをターゲットにした遺伝子治療
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09470354
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
井上 正樹 金沢大学, 医学部, 教授 (10127186)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
京 哲 金沢大学, 医学部, 助手 (50272969)
笹川 寿之 金沢大学, 医学部, 助手 (30272975)
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| Keywords | 産婦人科腫瘍 / テロメラーゼ / テロメア / TRAP法 / hTERT / 転写因子 / 遺伝子治療 |
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| Research Abstract |
テロメラーゼは染色体末端に働き、テロメアを伸張させる働きを持つRNAと2種類の蛋白から成るの複合酵素である。このうち酵素活性を司る触媒サブユニット蛋白であるhuman telomerase reverse transcriptase(hTERT)遺伝子が昨年クローニングされた。我々は卵巣癌や子宮癌などの婦人科癌組織や正常内膜組織にテロメラーゼ活性がみられ、その活性の中心はhTERTにあること明らかにした。
次に、テロメラーゼ活性を司どるhTERT遺伝子の発現を制御する因子及びその機構解明するために、hTERT遺伝子上流4kbのプロモーターをクローニングした。プロモーターの種々の長さの断片にルシフェラーゼ遺伝子を組み込み、種々の癌細胞や正常細胞に導入してその発現を観察したところ、hTERTの転写が癌細胞特異的に活性化されていることを認めた。転写開始部は翻訳開始部の上流78bpに存在することやプロモータの塩基配列はGC配列に富み、CAATやTATAboxを欠くことが判明した。さらに、コンピューター解析でSP1、AP2、エストロゲン受容体、cMYc・Max complexの結合部位が存在することが判明した。これら転写因子の発現ベクターとプロモター遺伝子を同時に細胞導入すると転写活性が数倍に増加する事が判明した。結合部位の塩基配列に変異を入れると転写の増強は見られず、これら転写は特異的であることが証明された。
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[Publications] Kyo S,et al: "hTERT as a critical determinant of telomerase activity in normal and malignant endometrium" Int J Cancer. 80. 60-63 (1998)
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[Publications] Kyo S,et al: "Quantitative difference of telomerase activity among ovaian malignant and premalignant lesions" Clin Cancer Res. 4. 399-406, (1998)
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[Publications] Ito H,et al: "Expression of human telomerase aubunits and corellation with telomerase activity in urothelial cancer." Clin Cancer Res. 4. 1603-1608, (1998)
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[Publications] Tanaka M,et al: "Expression of telomerase activity in human endometrium is localized to epithelial grandular cells and regulated in a menstrual phase-dependent manner correlated with cell proliferation" Am J Pathol. 153. 1985-1991 (1998)
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[Publications] Takakura M,et al.: "Cloning of human telomerase reverse transcriptase gene promoter and identification of proximal core promoter essential for tarnscriptional activation in immortalized and cancer cells." Cancer Res. 59. 551-557 (1999)
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[Publications] Takakura M,et al: "Expression of human telomerase subunits and correlation with telomerase activity in cervical cancer" Cancer Res. 58. 1558-1561 (1998)
