1998 Fiscal Year Annual Research Report

破骨細胞形成におけるメタロプロテアーゼ・インテグリンファミリー蛋白質の機能

Research Project

Project/Area Number	09470404
Research Institution	Nagasaki University
Principal Investigator	加藤有三長崎大学, 歯学部, 教授 (20014128)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	坂井詠子長崎大学, 歯学部, 教務職員 (10176612) 柴田光枝長崎大学, 歯学部, 助手 (20274665) 西下一久長崎大学, 歯学部, 助手 (20237697) 坂井英昭長崎大学, 歯学部, 助教授 (40225769)
Keywords	破骨細胞 / プロテアーゼ / 破骨細胞分化因子(ODF)
Research Abstract	最近,破骨細胞の分化因子である破骨細胞分化因子(ODF)を用いた画期的な破骨細胞形成法が報告された(Yasuda et al.(1998)).従来,in vitroにおける破骨細胞の形成にはフィーダーとなる骨芽細胞系間質細胞の共存が必須であり,このことが破骨細胞の分化成熟に関する細胞生物学的,文誌生物学的研究を困難にしていた.そこで我々は,保田らの用いたODFに修飾を加え,マウスODFの細胞外ドメイン(His132-Asp316)にヒスジンタグ(His-Tag)をつけた融合タンパク質を昆虫細胞(Sf9)で発現させ,リコンビナントODFを自作した.このODFは,マクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)の共存下で,マウス脾細胞から破骨細胞を誘導することができた(未発表).すなわち,間質細胞が共存しないため,破骨細胞のみに発現している細胞融合関連分子を分子生物学的手法によって探索することが格段に容易になった.一方,我々は,4-methoxy-2-naphthylamide(MNA)をカップルさせたペプチド性基質を5-nitro-salicyladehyde(NSA)存在下で用いることにより,生きた破骨細胞のリソソーム性システインプロテアーゼ活性を可視化する方法を開発した(Kamiyaet al.(1998)).この方法は,破骨細胞融合のときに関与すると思われるプロテアーゼ活性の検出にも応用できる有効な方法であると考えている.また,in vivoでの破骨細胞形成を簡便に行う方法として,ラットの歯の移動モデルを構築し,歯槽骨表面に誘導される破骨細胞の時間的変化の検討を行った(Kobayashi et al.(1998)).

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Y.Kobayashi: "Effects of local administration of osteocalcin on experimental toothe movement" Angle Orthodont.68・3. 259-266 (1998)
[Publications] F.Hashimoto: "Changes in expression of Osteocalcin,matrix Gla protein and Osteopontin mRNA during experimental tooth movement in rats" Dentistry in Japan. 34. 77-80 (1998)
[Publications] Y.Kobayashi: "Processing of NH_2- and COOH-terminal Peptides of rat osteocalcin by cathepsin B and cathepsin L" J.Bone Mine.Metab.16. 72-80 (1998)
[Publications] D.Sastradipura: "Identification of Cellular compartment involved in processing of Cathepsin E in primary cultures of rat microglia." J.Neurochem.70. 2045-2056 (1998)
[Publications] T.Kamiya: "Fluorescence microscopic demonstration of Cathepsin K activity as the major lysosomal cysteine proteinase in osteoclasts" J.Biochem. 123. 752-759 (1998)
[Publications] E.Kobayashi: "Force induced rapid changes in cell fate at modpalatal Suture cartilage of growing rats" J.Dent.Res.(in press). (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

破骨細胞形成におけるメタロプロテアーゼ・インテグリンファミリー蛋白質の機能

Principal Investigator

加藤 有三 長崎大学, 歯学部, 教授 (20014128)

Research Products

[Publications] Y.Kobayashi: "Effects of local administration of osteocalcin on experimental toothe movement" Angle Orthodont.68・3. 259-266 (1998)

[Publications] F.Hashimoto: "Changes in expression of Osteocalcin,matrix Gla protein and Osteopontin mRNA during experimental tooth movement in rats" Dentistry in Japan. 34. 77-80 (1998)

[Publications] Y.Kobayashi: "Processing of NH_2- and COOH-terminal Peptides of rat osteocalcin by cathepsin B and cathepsin L" J.Bone Mine.Metab.16. 72-80 (1998)

[Publications] D.Sastradipura: "Identification of Cellular compartment involved in processing of Cathepsin E in primary cultures of rat microglia." J.Neurochem.70. 2045-2056 (1998)

[Publications] T.Kamiya: "Fluorescence microscopic demonstration of Cathepsin K activity as the major lysosomal cysteine proteinase in osteoclasts" J.Biochem. 123. 752-759 (1998)

[Publications] E.Kobayashi: "Force induced rapid changes in cell fate at modpalatal Suture cartilage of growing rats" J.Dent.Res.(in press). (1999)

加藤有三長崎大学, 歯学部, 教授 (20014128)