成長板軟骨におけるbcl-2ファミリーの役割に関する研究

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09470410
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 實光 章年 大阪大学, 歯学部, 助手 (50263299)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 平沼 広子 大阪大学, 歯学部附属病院, 医員
• Keywords: 成長軟骨 / bcl-2遺伝子 / 細胞分化

Research Abstract

成長板軟骨におけるbcl-2遺伝子ファミリーの役割を検討する為に開発したp53ノックアウトマウス肋軟骨由来の軟骨芽細胞様細胞株N1511について、その形質発現についてまず検討を行なった本培養系は10%牛胎仔血清を含むαMEMで培養する。Northem blot分析によると培養系がコンフルエントに達した時にはI型及びII型コラーゲンmRNAを発現しており、IX型コラーゲンmRNAを発現していない。この後、血清不含のαMEMに30ng/ml hrBMP-2と10^<-7>Mのinsulinを添加して培養すると、24時間でIX型コラーゲン、II型コラーゲンの発現が開始、上昇した。5日目にはALPase活性の上昇に伴い、X型コラーゲンが出現した。また、II型コラーゲンはコンフルエント時はIIA型が優位であったが、7日間の培養期間においてIIB型が優位となった。本培養系から、hrBMP-2を除くと9時間以内にapoptosisを誘導することが明かとなり、BMPがapoptosisを抑制することが判明した。そこで本培養系でRT-PCR法にてbcl-2ファミリーの発現について検討した。この結果、bcl-2はコンフルエントから2日目にやや発現が低下するもののbax,bcl-X_Lの発現は細胞分化とapoptosisによっても変化しないことが明かとなった。さらに、胎生14日目のラット腓骨を用いて免疫組織学的にbcl-2の発現を検討した結果、免疫組織学的にはbcl-2の発現を検出できないことが判明した。

Research Products

• [Publications] T.Maeda. et al.: "Expression of VEGF in tuman oral SCC : its association with tumor progression and P53 gene streteas" Journal of Clinical Pathology. 51・10. 771-775 (1998)
• [Publications] A.Jikko et al.: "The role of HGF in growth plate cartilage" Journal of Bone Mineral Metabolism. 16. 170-177 (1998)
• [Publications] S.Matsumura et al: "Changes in phenotypie expression of Osteoblast after X irradiation" Radiation Research. 149. 463-471 (1998)
• [Publications] T.Kawai et al: "Cemento-osseous dysplasia of the jaw in 54 Japanese patient" Oral Surgery, Oral Medicine, Oral pathology oral Radielogy endodontecis. 87. 107-114 (1999)
• [Publications] A.Jikko et al: "Effects of IL-6 on Primliferation and proteoglyean Metabolism in Articular chondrocyte-cultures" Cell Biology International. (in press). Collagen integrin receptor regulate early aoteoblast differentiation induce by BMP-2 (1999)
• [Publications] A.Jikko et al: Journal of Bone and Meiual Research. (accpted). (1999)