肝臓における薬物輸送担体の多様性、遺伝的多型の解析

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09470501
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 杉山 雄一 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (80090471)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 粂 和彦 東京大学, 医学部, 助手 (30251218) ; 伊藤 清美 北里大学, 薬学部, 講師 (60232435) ; 加藤 将夫 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助手 (30251440) ; 鈴木 洋史 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助教授 (80206523)
• Keywords: 輸送担体 / 胆汁排泄 / 遺伝子クローニング / 遺伝的多型

Research Abstract

本年度は肝臓における薬物輸送担体のうち、canalicular multispecific organic anion transporter(cMOAT)の機能と、cMOATと同様な基質認識性をもつもののcMOATとは異なる有機アニオン輸送担体の機能について明かにした。すでに我々が遺伝子クローニングに成功しているcMOAT発現系をNIH-3T3細胞にて確立し、得られた細胞膜分画を用いた輸送実験からcMOATの代表的基質dinitrophenylglutathioneの輸送を確認することができた。本発現系は来年度以降、ヒトならびにラットcMOATの機能を直接評価できる実験系として極めて有効であることが期待される。次に、ヒトおよびラット肝臓より胆管側細胞膜ベシクルを調製し、種々の有機アニオン性医薬品の輸送機構を解析した。その結果、これまで胆汁排泄に関する輸送機構が全く不明であった、(i)抗癌剤塩酸イリノテカンならびにその活性代謝物、(ii)アンジオテンシン変換酵素阻害薬テモカプリラート、(iii)ニューキノロン系抗生物質Grepafloxacinとその代謝物、(iv)抗癌剤メソトレキセート、(v)潰瘍性大腸炎治療薬E3040代謝物、(vi)高脂血漿治療薬プラバスタチン、の胆汁排泄機構が主にcMOATであることを証明した。また、(vii)ソマトスタチン類似薬octreotideについてはp糖蛋白質が主な輸送機構であることが示唆された。さらに、cMOAT欠損動物Eisaihyperbilirubinemic ratを用いた解析により、(i)、(iii)、(v)についてはcMOATとは異なる別の有機アニオン輸送担体も胆汁排泄に関与することを証明した。

Research Products

• [Publications] X.Y.Chu: "Multiplicity of biliary excretion mechanisms for irinotecan,CPT-11,and its metabolites in rats." Cancer Research. 57・10. 1934-1938 (1997)
• [Publications] H.Ishizuka: "Temocaprilat,a Novel Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitor,is Excreted in Bile via and ATP-dependent Active Transporter(cMOAT)That is Deficient in Eisai Hyperbilirubinemic Mutant Rats(EHBR)" Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 280・3. 1304-1311 (1997)
• [Publications] H.Sasabe: "Carrier-mediated hepatic uptake of quinolone antibiotics in the rat" Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 282・1. 162-171 (1997)
• [Publications] M.Masuda: "Methotrexate is excreated into the bile by canalicular multispecificorganic anion transporter in rats" Cancer Research. 57・16. 3506-3510 (1997)
• [Publications] K.Niinuma: "Klnetic analysis of the primary active transport of conjugated metabolites across the bile canalicular membrane:comparative study of S-(2,4-dinitrophenyl)-glutathione and 6-hydroxy-5,7-dimethyl-2-methylamino-4-(3-pyrldylmethyl)benzothiazole glucuronide" Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 282・2. 866-872 (1997)
• [Publications] M.Yamazaki: "Biliary excretion of pravaststin in rats:contribution of the excretion pathway mediated by canalicular multispecific organic anion transporter(cMOAT)" Drug Metabolismsm and Disposition. 25・10. 1123-11129 (1997)
• [Publications] T.Yamada: "Carrier-mediated hepatic uptake of the cationic cyclopeptide octreotide,in rats" Drug Metabolismsm and Disposition. 25・2. 536-543 (1997)
• [Publications] K.Ito: "Functional analysis of a canalicular multispecific organic anion transporter cloned from rat liver" Journal of Biological Chemistry. 273・3. 1684-1688 (1998)
• [Publications] 鈴木洋史: "胆汁排泄のトランスポーター" 生化学. 69・9. 1098-1101 (1997)
• [Publications] 鈴木洋史: "肝臓病学の最前線" (中外医学社)山中、滝川編, (1997)