2000 Fiscal Year Annual Research Report
血小板粘着・凝集に関わる調節タンパク質の構造・機能相関
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09480155
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| Research Institution | Fujita Health University |
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Principal Investigator |
千谷 晃一 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 研究員 (60179942)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浜子 二治 藤田保健衛生大学, 短期大学・衛生技術科, 助教授 (80180933)
林 宣宏 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (80267955)
松井 太衛 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 講師 (90183946)
藤村 吉博 奈良県立医科大学, 輸血部, 教授 (80118033)
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| Keywords | 血小板凝集 / フォンビルブランド因子(vWF) / vWF活性化因子 / ビチセチン / コーシャギン / 生理的vWFプロテナーゼ / ジスインテグリン |
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| Research Abstract |
フォンビルブランド(vWF)分子上のビチセチン結合部位の探索:平成9年度に報告した、新しいvWF活性化因子であるビチセチンと、従来のボトロセチンとの作用機作を明らかにするため、本年度は、ビチセチンの結合するvWFのA-1ループドメインの種々の変異体をヒト由来の培養細胞で発現させ、ビチセチンとの結合能を解析した。その結果、ボトロセチン結合部位の比較的近傍に結合することが判明した(論文作成中)。最近、農業生物資源研究所の水野洋博士と共同で開始したビチセチンのX線結晶解析の研究もほぼ完成したので、私共の結果と照合し、ボトロセチン結合部位の更に明確な同定を行っている(論文作成中)。
コーシャギンの全アミノ酸配列の決定:Naja kaouthia蛇毒より新しく見出した、vWFに特異的に結合し、一箇所を切断するコーシャギンの全アミノ酸配列を決定した。コーシャギンはメタロプロテナーゼ、ジスインテグリン様ドメイン、Cys-richドメインからなるが、ジスインテグリンドメインとは別に、Cys-richドメインにRGD配列を持つユニークな蛇毒メタロプロテナーゼであることを発見し、合成ペプチドを作成し、そのいずれにもジスインテグリン作用のあることを同定した(Biochemistry(2001)印刷中)。
生理的vWF分解プロテナーゼの精製:ヒト血漿中にも、vWFを特異的に分解し、その活性を調節しているvWFメタロプロテナーゼが存在し、その欠損は血栓症などの疾病を惹起することが知られているが、未だその本体は不明である。本年度、リストセチン凝集阻害活性とマルチマー切断活性を指標として、我々もこの酵素の精製を行い同定中である。
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[Publications] Matsui,T., et al.: "Snake Venom Proteases Affecting Hemostasis and Thrombosis (Review)."Biochim.Biophys.Acta. 1477. 146-156 (2000)
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[Publications] 松井太衛 他: "立体構造から見たフォン・ビルブランド因子(vWF)の機能ドメイン."日本血栓止血学会誌. 11. 268-275 (2000)
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[Publications] Takatsuka,H., et al.: "Molecular Characterization of L-Amino Acid Oxidase from Agkistrodon halys blomhoffi with Special Reference to Platelet Aggregation."Biochim.Biophys.Acta. 1544. 207-277 (2001)
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[Publications] Yagi,H., et al.: "Enhanced Low Shear Stress Induced Platelet Aggregation by Shiga-like Toxin 1 Purified from Escherichia coli O157."Am.J.Hematol.. 66. 105-115 (2001)
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[Publications] Matsui,T. et al.: "Comparative Study of Blood Group-recognizing Lectins toward ABO Blood Group Antigens on Neoglycoproteins, Glycoproteins and Complex-type Oligosaccharides."Biochim.Biophys.Acta. (in press). (2001)
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[Publications] Kinoshita,S., et al.: "Upshaw-Schulman Syndrome Revisited : A Concept of Congenital Thrombotic Thrombocytopenic Purpura."Int.J.Hematol.. (in press). (2001)
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[Publications] Ito,M., et al.: "Complete Amino Acid Sequence of Kaouthiagin, a Novel Cobra Venom Metalloprotease with Two Disintegrin-like Sequences."Biochemistry. (in press). (2001)
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[Publications] 松井太衛 他.: "第7回血液アゴラ."メディカルジャーナル社. 129 (2000)
