1998 Fiscal Year Annual Research Report

低分子量G蛋白質Rasの標的蛋白質の多様性と細胞機能制御

Research Project

Project/Area Number	09480163
Research Institution	HIROSHIMA UNIVERSITY
Principal Investigator	菊池章広島大学, 医学部, 教授 (10204827)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	岸田想子広島大学, 医学部, 教務員 (40274089) 安東知子広島大学, 医学部, 助手 (20294548) 岸田昭世広島大学, 医学部, 助手 (50274064)
Keywords	Ras / Ral / RalBPl / POBl / Epsin / エンドサイトーシス / シグナル伝達 / Rapl
Research Abstract	昨年度の成果を発展させて、本年度はRalの活性化機構と作用機構を解析した。これまでにRasとRap1は共にRalGDSと結合するが、RasはRalを活性化し、Rap1は活性化しないことを明らかにしていた。Ras、Rap1、Ral、RalGDSの細胞内局在はそれぞれ細胞膜、核周囲、細胞膜、細胞質であった。RasとRap1の細胞内局在を決定するC末端側の脂質による翻訳後修飾を交換したキメラを作製したところ、細胞膜に局在できるキメラがRalを活性化した。また、細胞膜に局在する変異を施したRalGDSはRasの非存在下においてもRalを活性化した。したがって、RasはRalと同じ細胞内局在であり、かつRalGDSを細胞質から細胞膜にトランスロケートできるためにRalを活性化すると考えられる。Ralの作用機構を明らかにするために、昨年度はRalの標的蛋白質RalBP1の結合蛋白質POB1を単離した。本年度はPOB1のEHドメインに結合する蛋白質としてEpsinを単離した。POB1とEpsinは共に酵母のエンドサイトーシスを制御する蛋白質と共通のドメインを有していた。そこで、Ral、 RalBP1、POB1、Epsinのエンドサイトーシスにおける役割を解析したところ、これらの蛋白質の変異体がいずれもEGFとインスリン受容体のエンドサイトーシスを抑制した。したがって、Ralを介するシグナル伝達系がリガンド依存性の受容体のエンドサイトーシスを制御することが決定的になった。

Research Products
(12 results)

All Other

All Publications (12 results)

[Publications] Ikeda,M.: "Identification and characterization of a novel protein interacting with Ral-binding proteinl,a putative effector protein of Ral." J.Biol.Chem.273・2. 814-821 (1998)
[Publications] Shirouzu,M.: "Interactions of the amino acid residues at position 31 of the c-Ha-Ras protein with Raf-1 and RalGDS." J.Biol.Chem.273・13. 7737-7742 (1998)
[Publications] Kigawa,T.: "Solution structure of the Ras-binding domain of RGL." FEBS lett.441・3. 413-418 (1998)
[Publications] Ikeda,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,forms a complex with GSK-3β and β-catenin and promotes GSK-3β-dependent phosphorylation of β-catenin." EMBO J.17・5. 1371-1384 (1998)
[Publications] Yamamoto,H.: "Axil,a member of the Axin family,interacts with both glycogen synthase kinase 3β and β-catenin and inhibits axis formation of Xenopus embryos." Mol.Cell.Biol.18・5. 2867-2875 (1998)
[Publications] Kishida,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,directly interacts with adenomatous polyposis coli and regulates the stabilization of β-catenin." J.Biol.Chem.273・18. 10823-10826 (1998)
[Publications] Matubara,K.: "Plasma membrane recruitment of RalGDS is critical for Ras-dependent Ral Activation." Oncogene. 18・6. 1303-1312 (1999)
[Publications] Sawamoto,K.: "Ectopic expression of mutationally-activated RalGTPase inhibits cellshape changes during Drosophila eye development." Oncogene. (in press). (1999)
[Publications] Koshiba,S.: "Solution structure of the Eps15 homology domain of a human POB1(partner of RalBP1)" FEBS lett.442・2-3. 138-142 (1999)
[Publications] Kishida,M.: "Axin prevents Wnt-3a-induced accumulation of β-catenin." Oncogene. 18・4. 979-985 (1999)
[Publications] Kishida,S.: "DIX domains of Dvl and Axin are necessary for protein interactions and their ability to regulate β-catenin stability." Mol.Cell.Biol.(in press). (1999)
[Publications] Yamamoto,H.: "Phosphorylation of Axin,a Wnt signal negative regulator,by glycogen synthase kinase-3β regulates its stability." J.Biol.Chem.(in press). (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

低分子量G蛋白質Rasの標的蛋白質の多様性と細胞機能制御

Principal Investigator

菊池 章 広島大学, 医学部, 教授 (10204827)

Research Products

[Publications] Ikeda,M.: "Identification and characterization of a novel protein interacting with Ral-binding proteinl,a putative effector protein of Ral." J.Biol.Chem.273・2. 814-821 (1998)

[Publications] Shirouzu,M.: "Interactions of the amino acid residues at position 31 of the c-Ha-Ras protein with Raf-1 and RalGDS." J.Biol.Chem.273・13. 7737-7742 (1998)

[Publications] Kigawa,T.: "Solution structure of the Ras-binding domain of RGL." FEBS lett.441・3. 413-418 (1998)

[Publications] Ikeda,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,forms a complex with GSK-3β and β-catenin and promotes GSK-3β-dependent phosphorylation of β-catenin." EMBO J.17・5. 1371-1384 (1998)

[Publications] Yamamoto,H.: "Axil,a member of the Axin family,interacts with both glycogen synthase kinase 3β and β-catenin and inhibits axis formation of Xenopus embryos." Mol.Cell.Biol.18・5. 2867-2875 (1998)

[Publications] Kishida,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,directly interacts with adenomatous polyposis coli and regulates the stabilization of β-catenin." J.Biol.Chem.273・18. 10823-10826 (1998)

[Publications] Matubara,K.: "Plasma membrane recruitment of RalGDS is critical for Ras-dependent Ral Activation." Oncogene. 18・6. 1303-1312 (1999)

[Publications] Sawamoto,K.: "Ectopic expression of mutationally-activated RalGTPase inhibits cellshape changes during Drosophila eye development." Oncogene. (in press). (1999)

[Publications] Koshiba,S.: "Solution structure of the Eps15 homology domain of a human POB1(partner of RalBP1)" FEBS lett.442・2-3. 138-142 (1999)

[Publications] Kishida,M.: "Axin prevents Wnt-3a-induced accumulation of β-catenin." Oncogene. 18・4. 979-985 (1999)

[Publications] Kishida,S.: "DIX domains of Dvl and Axin are necessary for protein interactions and their ability to regulate β-catenin stability." Mol.Cell.Biol.(in press). (1999)

[Publications] Yamamoto,H.: "Phosphorylation of Axin,a Wnt signal negative regulator,by glycogen synthase kinase-3β regulates its stability." J.Biol.Chem.(in press). (1999)

菊池章広島大学, 医学部, 教授 (10204827)