1998 Fiscal Year Annual Research Report

アクチン系細胞骨格を介したシグナル伝達とアポトーシス:ERM蛋白質の役割

Research Project

Project/Area Number	09480193
Research Institution	KYOTO UNIVERSITY
Principal Investigator	月田早智子京都大学, 医療技術短期大学部, 教授 (00188517)
Keywords	ERM / エズリン / ラディキシン / モエシン / Rho / リン酸化 / CD44 / Rhoキナーゼ
Research Abstract	Rhoの直接ターゲットであるキナーゼによるERM蛋白質のリン酸化の検討:これまでに、ERMとCD44の結合がRhoによって制御されていることを証明した。一方、Rhoの直接のターゲットとしていくつかのセリン・スレオニンリン酸化酸素が同定されている。また、ERMはそのセリン・スレオニン残基がよくリン酸化されることが知られている。そこで、Rhoの直接のターゲットであるキナーゼによってEMR蛋白質がリン酸化され、その機能が変化してしてCD44との結合能を獲得するという仮説が考えられる。この仮説を検討する第一歩として、貝渕ら(奈良先端大)により同定されたRHOのターゲットキナーゼであるRhoキナーゼとPKNによって、ERMがin vitroでリン酸化されるかどうかを検討した。リン酸化型ERM蛋白質の機能解析:リン酸化型特異抗体の作製:もし、上記の仮説が正しければ、活性化型RhoによってRhoキナーゼが活性化し、ERMがリン酸化され、リン酸化ERMがCD44などの膜蛋白質と結合して膜に移る筈である。そこで、実際にリン酸化型ERMが細胞膜に移行するかどうかを、細胞レベルで調べてみる必要性がある。この目的のために、リン酸化型ERMを特異的に認識するモノクローナル抗体を作製した。具体的には、上述の解析により、リン酸化部位を決め、その部分のリン酸化ペプチドを合成し、これを抗原にして、モノクローナル抗体を作製し、その中からリン酸化ERMを特異的に認識するクローンを選択した。活性型(リン酸化型)ERM蛋白質の作製:以上の考え方が正しく、それが証明されたので、次に構成的に活性な(constitutively activeな)ERMを作製することを目的とした。すなわち、安定にリン酸化型として振る舞うERMの作製を試みた。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yonemura,S.et al.: "ERM proteins bind to a specific group of integral membrane proteins containing a positively-harged amino acid cluster in their juxta-membrane cytoplasmic domain." J.Cell Biol.140. 885-895 (1998)
[Publications] Matsui,T.et al.: "Rho-kinase phosphorylates carboxy-terminal threonines of ERM proteins and regulates their head-to-tail association" J.Cell Biol.140. 647-657 (1998)
[Publications] Doi,Y.et al.: "Moesin is not a receptor for measles virus entry into mouse embryonic stem cells." J.Virol.72. 1586-1592 (1998)
[Publications] Doi,Y.et al.: "Moesin gene knockout:Normal development of mice and unimpaired cell adhesion/cell motiltiy/actin-based cytoskeleton without compensatory up-regulation of ezrin and radixin" J.Biol.Chem.(印刷中). (1999)
[Publications] Furuse,M.et al.: "A single gene product,claudin-1 or -2,reconstitutes tight junction strands and recruits occludin in fibroblasts" J.Cell Biol.143. 391-401 (1998)
[Publications] Morita,K.et al.: "Claudin multigene family encoding four-transmembrane domain protein components of tight junction strands" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (印刷中). (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

アクチン系細胞骨格を介したシグナル伝達とアポトーシス:ERM蛋白質の役割

Principal Investigator

月田 早智子 京都大学, 医療技術短期大学部, 教授 (00188517)

Research Products

[Publications] Yonemura,S.et al.: "ERM proteins bind to a specific group of integral membrane proteins containing a positively-harged amino acid cluster in their juxta-membrane cytoplasmic domain." J.Cell Biol.140. 885-895 (1998)

[Publications] Matsui,T.et al.: "Rho-kinase phosphorylates carboxy-terminal threonines of ERM proteins and regulates their head-to-tail association" J.Cell Biol.140. 647-657 (1998)

[Publications] Doi,Y.et al.: "Moesin is not a receptor for measles virus entry into mouse embryonic stem cells." J.Virol.72. 1586-1592 (1998)

[Publications] Doi,Y.et al.: "Moesin gene knockout:Normal development of mice and unimpaired cell adhesion/cell motiltiy/actin-based cytoskeleton without compensatory up-regulation of ezrin and radixin" J.Biol.Chem.(印刷中). (1999)

[Publications] Furuse,M.et al.: "A single gene product,claudin-1 or -2,reconstitutes tight junction strands and recruits occludin in fibroblasts" J.Cell Biol.143. 391-401 (1998)

[Publications] Morita,K.et al.: "Claudin multigene family encoding four-transmembrane domain protein components of tight junction strands" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (印刷中). (1999)

月田早智子京都大学, 医療技術短期大学部, 教授 (00188517)