1997 Fiscal Year Annual Research Report
バイオセンサーのスイッチングによる広域ウイルス抵抗性戦略の構築
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09556071
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
難波 成任 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (50189221)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
芦刈 俊彦 (株)サントリー基礎研究所, 主任研究員
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| Keywords | Potyvirus科 / 形質転換植物 / 発現機作 / Agrobacterium tumefaciens |
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| Research Abstract |
Potyvirus科のウイルス(potato virus Y、azuki bean mosaic virus、tobacco etch virus)、Capillovirus属のcitrus tatter leaf virus、およびTrichovirus属のpotato virus Tの感染植物よりそれぞれウイルスを精製し、ゲノムRNAを抽出した後cDNAを合成した。これをそれぞれプラスミドベクターにクローニングしたのち、それらのクローンのインサートをDNAシークエンサーを用いて解析し、それぞれのゲノムの塩基配列を決定した。それぞれのウイルスゲノムのpolymerase gene(POL)、cell-to-cell movement protein gene(MP)、protease gene(PRO)、coat protein gene(CP)の配列をもとに、それらの遺伝子に共通した保存配列を解析した。また、データベースの種々のウイルスゲノムの配列データを用いて、各ウイルスのモチーフに必須の配列を解析した。その結果、それぞれのウイルスについて、必須の配列領域が推定された。これらのデータを元に、citrus tatter leaf virusおよびcucumber mosaic virus、tobacco etch virusなどのウイルスの外被タンパク質の領域を用いてcauliflower mosaic virusの35Sプロモーターおよびnosタ-ミネータ等の配列と併せて植物発現ベクターを構築した。これをAgrobacterium tumefaciens に導入し、植物のリ-フディスクを用いてその細胞を形質転換した。これを無菌条件下で培養し、再分化させ、植物体を作出し、外被タンパク質発現形質転換植物を作出した。これらを用いて、その抵抗性の発現機作を解析し、今後の実験の基礎データとした。
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[Publications] Namba,S.: "Complete nuclestide sequence of wheat yellow mosaic bymovirus genomic RNAs" Archives of Virology. 143. 1-13 (1998)
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[Publications] Xiaoyun,L.: "The genome organization of the broad bean Necrosis virus(BBNV)" Archives of Virology. in press (1998)
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[Publications] Xiaoyun,L.: "The 3'terninal sequence of RNA1 of Wheat Spindle Streak mosaic virus Canadian Isolate(WSSMV-C)" European Journal of Plant Pathology. (in press). (1998)
