1999 Fiscal Year Annual Research Report
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09557030
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| Research Institution | Fujit Health University |
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Principal Investigator |
黒澤 良和 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 教授 (10109259)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊庭 善孝 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (90298547)
赤堀 泰 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (80221711)
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| Keywords | ファージディスプレー系 / ファージ抗体 / 抗体レパートリー / ヒト抗体 / 抗原抗体反応 |
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| Research Abstract |
本研究は様々な抗原に対してそれをスクリーニングするだけで各々の抗原に特異的に結合する抗体が必ず含まれる抗体ライブラリー作製を目標に計画された。最初数10名のBリンパ球に富むヒト臨床材料を用いてその中で発現されている抗体遺伝子をRT-PCR法で数多く回収し、遺伝子ライブラリーを構築した。それをFab型の抗体がファージ粒子上にcp3と融合して発現される系を用いて1,000億種の抗体を含む抗体ライブラリーが出来上がった。この抗体ライブラリーを用いて数10種類の様々な性質をした抗原に対してスクリーニングしたところ、いづれの場合も複数種のモノクローン抗体を単離することができた。その中にはWestern blot用の試薬として、又発現プロフィール解析用試薬として役立つものも含まれている。更にタンパクの特定リン酸化部位を認識する抗体単離もスクリーニング法さえ工夫すれば可能であった。ほぼ最初計画した通りの理想的な抗体ライブラリー作製を完了したので、その利用法の開発を進める。
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[Publications] C. Miyazaki: "Changes in the specificity of antibodies by site-specific mutagenesis followed by random mutagenesis"Protein Engineer.. 12. 407-415 (1999)
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[Publications] K. Hashimoto: "Conservation and diversification of MHC class I and its related molecules in vertebrate"Immunol. Rev.. 167. 81-100 (1999)
