2000 Fiscal Year Annual Research Report
細胞周期抑制因子の遺伝子導入による増殖性糸球体腎炎の遺伝子治療の試み
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09557090
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| Research Institution | TOKYO MEDICAL AND DENTAL UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
寺田 典生 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (30251531)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻田 代志雄 三共株式会社第一生物研究所, 所次長
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| Keywords | アデノウイルス / サイクリン / 細胞周期 / 糸球体腎炎 / メサンギウム細胞 / cGMP / HMG-CoA還元酵素阻害薬 / グルココルチコイド |
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| Research Abstract |
最終年度である平成12年度は、腎病変において、最も頻度が高い糸球体病変の病態を解明するため、メサンギウム細胞の増殖の機序を細胞内情報伝達系及び、細胞周期調整遺伝子の発現の点から検討した。我々は、まずメサンギウム細胞の増殖に関与する因子の一つがPDGF-B鎖とb受容体の発現亢進であることをつきとめた。次にPDGF、TGF-bなどを含めた増殖因子によりどのようにメサンギウム細胞の増殖の調節がなされているかを、細胞膜から核内に至るまでの細胞内情報伝達系の生理的および、病的意義につき検討を加えた。特にMAP kinase(K),p38K cascadeは各種受容体の刺激を細胞増殖、蛋白合成など種々の細胞機能に伝達、変換していると考えられるが、その生理的役割を検討した。我々は、尿細管細胞およびメサンギウム細胞において、活性型MAPKKを強制発現させるとcyclin D1 promoter活性が亢進し細胞周期はG1-Sへ移行すること、一方TGF-bがTGF-b-activating kinase(TAK)1-MKK6-p38Kの活性化によりcyclin D1 promoter活性を抑制し細胞増殖を抑制することを示した。またPDGFなどによるメサンギウム細胞の増殖にはcyclin D1の遺伝子発現とRb蛋白のリン酸化が必須であり、アデノウイルスを用いた細胞周期抑制遺伝子(p16,p21)の強制発現により、細胞周期は抑制されることを報告した。HMG-CoA還元酵素阻害薬が、細胞周期抑制遺伝子(p27)の転写亢進を介して、メサンギウム細胞の増殖抑制をきたすことをin vitro及びin vivoの系で示した。またANP,CNP及びそのsecond messengerであるcGMPが、cyclin Eの転写活性を低下させることにより、腎細胞での細胞周期抑制を引き起こすことを報告した。またグルココルチコイドがメサンギウム細胞の細胞周期抑制をp21を介して起こすことをin vivo及びin vitroで示した。
特定の遺伝子のアデノウイルス等を用いての導入については、基礎的検討で、尿管からアデノウイルスを導入する方法を開発し発表した。
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[Publications] O.Nakashima et al.: "Activated STAT1 supresses proliferation of cultured rat mesangial cells"Kidney International. 57. 2249-2257 (2000)
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[Publications] K.Nasu et al.: "Adenoviral Transfer of Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor Genes Suppresses Collagen-Induced Arthritis in Mice"Journal of Immunology. 165. 7246-7252 (2000)
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[Publications] M.Kuwahara et al.: "Functional characterization of a water channel of the nematode Caenorhabditis elegans"Biochimica et Biophysica Acta - Gene Structure & Expression. 1517. 107-112 (2000)
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[Publications] Y.Terada et al.: "Gene transfer and expression of SMAD7 using adenovirus combined with in vivo electroporation in unilateral ureteral obstruction in rats"Kidney International. (in press).
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[Publications] Y.Terada et al.: "Glucocorticoids stimulate p21^<CIP1> and arrest cell cycle in vitro and in anti-GBM glomerulonephritis"Kidney International. (in press).
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[Publications] S.Hanada et al.: "Cyclic GMP using adenovirus inhibits Cyclin E Transcription and mesangial cell cycle"American Journal of physiology. (in press).
