1998 Fiscal Year Annual Research Report

薬剤により発現制御可能なオピエート遺伝子導入異種細胞による疼痛治療

Research Project

Project/Area Number	09557118
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	斎藤洋一大阪大学, 医学部, 助手 (20252661)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	綿引正則ニッポンジーン (株), 研究開発部, 部長恵口豊大阪大学, 医学部, 助教授 (20243206) 有田憲生大阪大学, 医学部, 講師 (80159508)
Keywords	Pain / β-endorphin / polymer capsule / ex vivo gene therapy / xenograft / Tet-On system / tetracycline / doxycycline
Research Abstract	我々の研究では新しい鎮痛治療法として、β-endorphin(最も強力なオピエート)の前駆体遺伝子(POMC)を、テトラサイクリン作動性のジーンスイッチ、Tet-On systemの下流に遺伝子組み換えをおこない、それをマウス神経芽細胞腫株(Neuro2A)に遺伝子導入し、ポリマーカプセルに封入して髄腔内に移植した。細胞は腹腔内に投与したテトラサイクリン誘導体の量に応じて、ペプチドを分泌することを確認した。しかしながら、Tet-On systemとβ-endorphinの前駆体遺伝子との相性が悪いためか、この細胞株はβ-endorphinを分泌しなかった。遺伝子導入を繰り返しても、β-endorphinを分泌する細胞株を樹立できなかった。そこで、ヒト型β-endorphinを分泌させるために、signal codonの下流のPC1酵素認識部位にヒト型β-endorphinの遺伝子配列を組み替えして、short POMC遺伝子を作成した。それをNeuro2Aに遺伝子導入したが、O-endorphin分泌は得られなかった。この結果はshort POMC遺伝子が短すぎるのと、ribosome膜上でのペプチドの露出サイドの問題と考えられた。そこで現在は、前駆体遺伝子POMCのsignal codonの下流にヒト型O-endorphin遺伝子配列、その下流にmetallopeptidaseの認識配列、またその下流にtransmembrane domain遺伝子を組み換え、繊維芽細胞に遺伝子導入している。予備実験の結果としてはヒト型β-endorphin分泌を確認している。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Y. Saitoh et al: "Motor cortex stirmulation for phentom limb pain" The Lancet. (1999)
[Publications] Y. Hagihara et al: "Functional assessment of encapsulated cells transtected with Tet-On systen for a long term" Cell Transplant. (in press).
[Publications] Y. Kamada et al: "Pergolide-treated prolatinoma and its histology" Endocrine J. 45. 605-606 (1998)
[Publications] Y. Hagihara et al: "Brain protection by human bel-2 gene transfection into rat CNS" Restorative Neurological Neuroscience. (in press).
[Publications] 斎藤洋一他: "Tet-On systemを遺伝子導入した細胞による中枢神経系細胞療法" Biotherapy. 12. 595-598 (1998)
[Publications] Y. Saitoh et al: "Dose-dependent doxycycline-mediated adew corticotropic hornune sectetion from encapsutated Tet-On praopliomeknocortin News LA cells it tle subevaclmaid space" Human Gene Therapy. 9. 997-1002 (1998)
[Publications] 斎藤洋一: "「痛み」の診療大脳皮質運動野刺激法 (印刷中)" 克誠堂出版,

1998 Fiscal Year Annual Research Report

薬剤により発現制御可能なオピエート遺伝子導入異種細胞による疼痛治療

Principal Investigator

斎藤 洋一 大阪大学, 医学部, 助手 (20252661)

Research Products

[Publications] Y. Saitoh et al: "Motor cortex stirmulation for phentom limb pain" The Lancet. (1999)

[Publications] Y. Hagihara et al: "Functional assessment of encapsulated cells transtected with Tet-On systen for a long term" Cell Transplant. (in press).

[Publications] Y. Kamada et al: "Pergolide-treated prolatinoma and its histology" Endocrine J. 45. 605-606 (1998)

[Publications] Y. Hagihara et al: "Brain protection by human bel-2 gene transfection into rat CNS" Restorative Neurological Neuroscience. (in press).

[Publications] 斎藤 洋一 他: "Tet-On systemを遺伝子導入した細胞による中枢神経系細胞療法" Biotherapy. 12. 595-598 (1998)

[Publications] Y. Saitoh et al: "Dose-dependent doxycycline-mediated adew corticotropic hornune sectetion from encapsutated Tet-On praopliomeknocortin News LA cells it tle subevaclmaid space" Human Gene Therapy. 9. 997-1002 (1998)

[Publications] 斎藤 洋一: "「痛み」の診療 大脳皮質運動野刺激法 (印刷中)" 克誠堂出版,

斎藤洋一大阪大学, 医学部, 助手 (20252661)

[Publications] 斎藤洋一他: "Tet-On systemを遺伝子導入した細胞による中枢神経系細胞療法" Biotherapy. 12. 595-598 (1998)

[Publications] 斎藤洋一: "「痛み」の診療大脳皮質運動野刺激法 (印刷中)" 克誠堂出版,