1997 Fiscal Year Annual Research Report

遺伝子クローニングのための染色体工学システムの開発

Research Project

Project/Area Number	09557132
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	加藤秀則九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	和氣徳夫九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606) 西田純一九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (40264113)
Keywords	1番染色体 / 子宮体癌 / 微小核融合 / 癌抑制遺伝子 / YAC / STSマーカー / STFs
Research Abstract	ヒト1番染色体上の子宮内膜癌増殖抑制遺伝子座を明らかにする目的で、まず始めにヒト1番染色体短腕のみを持つGM1173と長腕のq12からq31までの欠損をもつAqD1Q細胞を子宮内膜癌細胞株HHUAに微小核融合し、増殖抑制を観察した。その結果GN1173では増殖抑制はみられなかったが、A9D1Q細胞の移入では、ほとんどの細胞で細胞死が観察された。これは子宮内膜増殖遺伝子がヒト1番染色体長腕のq31より遠位に存在することを示すものであった。つぎにさらに詳細にこの遺伝子座を同定するために、ヒト1番染色体に1000-3000radの放射線照射を行い様々な長さのSTFsを作製した。10・50Mbの長さのq31・telの領域内に存在するSTFsがおよそ30種類得られ、この中から有用である5つのクローンを選択しHHUAに微小核融合を行った。この結果子宮内膜癌増殖遺伝子座がヒト1番染色体長腕遠位部の、q31・41の間に存在することが明らかになった。より詳細な位置を決定するために(1)テロメアベクターに、この領域内に存在するマーカーであるD1S103からbubble PCRで得られたDNA断片を組み込みA9D1Qにターゲティングし、D1S103より遠位が欠損した染色体の作製を試みた。現在のところ目的のクローンは得られておらず、手法の改良などを検討している。(2)q32・41間のSTSマーカーを用い、60例の臨床癌検体についてLOH解析を行った。約50%の症例がD1S225-D1S459の間に異常をもつことが明らかとなった。この領域をカバーするYACクローンを得、HHUAに導入したところ1番染色体の微小核融合の場合と同じく細胞死が誘導され、親細胞のもつ高いテロメラーゼ活性も抑制されていた。これらのことよりこのYACクローンがもつゲノム領域(約1Mb)に子宮内膜癌増殖抑制遺伝子が存在すると考えられた。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Vojta,P,V et al: "Evidence for Two Senescence Loci on Human Chromosomel." Genes,Chrs and Cancer. 16. 55-63 (1996)
[Publications] Aoyama H: "Specificity of antibodies against rodent transforming growth factor alphaprotein." J.Histochem.cytochem. 45. 695-701 (1997)
[Publications] Mastuda T: "Human chromosome 7 carries a putative tumor suppressor gene(s) involved in choriocarcinoma." Oncogene. 15. 2773-2781 (1997)
[Publications] Wake N: "Genetics of gestational trophoblastic diseases." CME Journal of Gynecologic Oncology. (in press).
[Publications] Wake N: "Genetics of gynecological cancer-molecular events implicated in trophoblastic neoplasia development." The proceeding of X V FIGO. (in press).
[Publications] Kanuma T,et al: "Alterations of the pl6^<INK4A> gene in human ovarian cancers." Molecular Carcinogenesis. 18. 134・141 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

遺伝子クローニングのための染色体工学システムの開発

Principal Investigator

加藤 秀則 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392)

Research Products

[Publications] Vojta,P,V et al: "Evidence for Two Senescence Loci on Human Chromosomel." Genes,Chrs and Cancer. 16. 55-63 (1996)

[Publications] Aoyama H: "Specificity of antibodies against rodent transforming growth factor alphaprotein." J.Histochem.cytochem. 45. 695-701 (1997)

[Publications] Mastuda T: "Human chromosome 7 carries a putative tumor suppressor gene(s) involved in choriocarcinoma." Oncogene. 15. 2773-2781 (1997)

[Publications] Wake N: "Genetics of gestational trophoblastic diseases." CME Journal of Gynecologic Oncology. (in press).

[Publications] Wake N: "Genetics of gynecological cancer-molecular events implicated in trophoblastic neoplasia development." The proceeding of X V FIGO. (in press).

[Publications] Kanuma T,et al: "Alterations of the pl6^<INK4A> gene in human ovarian cancers." Molecular Carcinogenesis. 18. 134・141 (1997)

加藤秀則九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392)