1998 Fiscal Year Annual Research Report
大型藻類の窒素代謝の解明-グルタミン酸脱水素酵素のアイソザイムの誘導と細胞内分布
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09640781
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| Research Institution | Toho University |
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Principal Investigator |
岡田 光正 東邦大学, 理学部, 教授 (80057629)
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| Keywords | オオハネモ / グルタミン酸脱水素酵素 / 細胞内局在 / 進化 / 遺伝子解析 / 同義置換 / 窒素代謝 / 誘導 |
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| Research Abstract |
1) グルタミン酸デヒドロゲナーセ(GDH)の誘導
前年度に、採集したオオハネモのGDH活性が培養中に上昇することを報告した。今年度はこの活性上昇に対する窒素源の効果を調べた。天然海水および人工海水中で明暗条件下で培養すると、GDH活性は10日後には約1.9倍まで上昇し、その後ゆるやかに1.25倍までに減少した。このとき培地にNH_4Clを加えると、増加が速まった。特に10mM添加したとき、2.65倍までに上昇し、その時期も5日に短縮された。NaNO_3の添加では、活性の増加率は変化しなかったが、最大増加までの日数の減少がみられた。この活性増加は、恒暗条件化ではより大きかった。また、葉緑体GDHの活性上昇にはリン酸化が関係する結果が得られ、活性化の際の細胞内情報伝達経路が示唆された。
2) GDH遺伝子の解析
PCRにより複数のGDH部分遺伝子得て、最大540bpが明らかになった。約420アミノ酸のうち180が明らかになった。また、全構造をふくむファージを得ており、それから直接配列を決めることも試みたが、成功しなかったので条件を検討している。得られた複数の遺伝子から分子系統樹を作成したところ、1つは細菌に近く、もう一方は原生生物に近く、いずれも緑色植物とはかけ離れていた。このことは、緑藻の起源とその後の進化の解釈に多くの示唆を含んでいる。
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[Publications] R.Inokuchi, M.OKADA et al.: "Bryopsis maxima(chlurophyra)glutamate dehydrogenase:Multiple genes and isozumes" J.Phycology. (in press). (1999)
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[Publications] M.Ohkubo, D.Yagi & M.Okada: "Ettects of humic and fulvic acids on the growth of Microcystic aeruginose" Environmental technology. 19. 611-617 (1998)
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[Publications] S.Satoh, K.Nakayama U.M.Okada: "Molecular cloning and functional expression of a water-Soluble chlcratuyll protein" J.Biol.Chem. 173(46). 30563-30575 (1998)
