1998 Fiscal Year Annual Research Report
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09640792
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
中村 正久 広島大学, 理学部, 教授 (40130025)
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| Keywords | SF-1 / Ad4BP / FTZ-F1 / 性腺 / 両生類 / cDNA / ノーゲン解析 / in situ ハイブリダイゼーション / 生殖細胞 |
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| Research Abstract |
SF-1/Ad4BPは哺乳類の生殖腺形成を支配する遺伝子として知られているが、SF-1/Ad4BPcDNA(2.1kb)と転写調節領域のDNA断片(4.6kb)を哺乳類以外の脊椎動物(ツチガエル)から初めて単離した。SF-1/Ad4BPcDNAの翻訳領域は468のアミノ酸をコードしており、牛SF-1/Ad4BPとの相同性はアミノ酸レベルで62%であった。ツチガエルの成体組織におけるこの遺伝子の発現をノーザン解析によって検討したところ、精巣でのみ発現していた。RT-PCR法では精巣、脳、脾臓及び副腎で発現がみられたが、卵巣では発現していなかった。この遺伝子の5'上流側転写調節領域(4.6kb)を単離してその構造を解析したところ、両生類と哺乳類のSF-1/Ad4BPの転写調節領域の塩基配列は著しく異なっており、両生類と哺乳類では転写調節因子が異なる可能性がある。また、in situハイブリダイゼーション法によって、性腺形成の初期に発現すること、また未発達の精巣で強く発現し卵巣では発現が極めて弱いことも見出した。さらに、SF-1/Ad4BPと構造が類似しているFTZ-F1はショウジョウバエの体節形成に必須なFTZ(fushi tarazu)の転写調節因子であることが知られているが、脊椎動物におけるFTZ-F1の役割を解明するため、FTZ-F1cDNA(2.1kb)を両生類(ツチガエル)から単離した。遺伝子の構造解析によって、FTZ-Fは少なくとも8つのエクソンから成ること、スプライシングによって2つのタイプのFTZ-F1mRNAが形成されて大小2つの蛋白が合成されること、大きい蛋白は変態後の精巣で極めて強い発現を示すことを見出した。さらに、in situハイブリダイゼーション法とFTZ-F1ペプチド抗体を用いた組織免疫染色法によってFTZ-F1が初期精細胞と卵細胞に発現することを見出した。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] Kawano K.: "Molecular cloning and expression of the SF-1/Ad4BP genes in the frog,Rana rugosa." gene. 222. 169-176 (1998)
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[Publications] Miura I.: "The origin and differentiation of the heteromorphic sex chromosomesZ,W,X and Y in the frog Rana rugosa,inferred from the sequences of a sex-linked gene,ADP/ATP translocase." Mol.Biol.Evol.15. 1612-1619 (1998)
