1999 Fiscal Year Annual Research Report
ユーグレナのオルガネラ構築分子の転送と組込に関する分子細胞形態学的研究
Project/Area Number |
09640795
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Research Institution | Nippon Sport Science University |
Principal Investigator |
長船 哲斉 日本体育大学, 体育学部, 教授 (70074630)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大城 香 東海大学, 海洋学部, 教授 (90101104)
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Keywords | ユーグレナ / LHCPII / ゴルジ装置 / 塩化カドミウム |
Research Abstract |
暗静置培養したユーグレナ細胞は脂質(ワックスエステル)を細胞内に蓄積する。このような細胞をアンモニウム塩を含む無機培地に移したのち、培養液中に最終濃度が300μMになるように塩化リチウムを添加し温度26℃、1500luxの光照射をおこなった。光照射直後を0時間として経時的ににクロロフィル、カロテノイド量を測定すると24時間後、塩化リチウムの著しい抑制効果がみられた。電子顕微鏡によりプラスチド構造を観察すると、24時間ではプロプラスチドの発達はみられず数枚のチラコイド膜が形成され、電子密度の高い物質がプロプラスチドの周辺とゴルジ装置に蓄積された。すなわち、クロロフィル、カロテノイド量は24時間後0.06pg/cell,0.34pg/cellを示し、さきに報告したように塩化リチウム(LiCl)と同じような効果がみられた。ユーグレナのLHCPIIは細胞核にコードされ細胞質で合成された後、ゴルジ装置を経由し葉緑体に輸送されることが示唆された。塩化カドミウムを300μM添加し、24時間光照射後の細胞を抗LHCPII抗体-Protein Aゴールドで処理し、免疫電子顕微鏡法で観察すると、LHCPIIはCOS構造と細胞核とに局在し、低温処理細胞や塩化リチウム添加において観察されたと同じような結果が得られた。以上、今回の塩化カドミウムの実験結果、さらには前回の塩化リチウムや低温処理によるLHCPIIタンパク質分子のゴルジ装置への輸送を阻害すると、LHCPIIは細胞核およびCOS構造へ一時的に局在する。このことから、ユーグレナのLHCPIIタンパク質分子はゴルジ装置を経由して、葉緑体に輸送されていることが明確に裏付けられる。
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[Publications] K. Kitayama, T. Osafune, R. Togasaki: "Subcellular localization of iron and manganese SOD in Chlamydomonas reinhardtii."Journal of phycology. 35. 136-142 (1999)
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[Publications] Ito-kuwa, K. Nakamura, S, Aoki, T. Osafune, V. Vidotto, K, Pienthaweecha: "Oxidative stress Sensitivity and SOD of a wild type parent strain and a respiratory mutant of Candida albicans"Medical Mycology. 37. 307-314 (1999)
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[Publications] M. Kitayama, Y. Takahashi, T. Osafune, R. Togasaki: "Characterization of transformant of Chlamydomonas reinharditii with anti sense directed cDNA of Phosphogiycerate kinase"Photosynthesis. 3. 2055-2058 (1999)
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[Publications] S. Schwartzbach, T. Osafune, W. Loffelhardt: "Protein import into cyanelles and complex chloroplasts."Plant Molecular Biology. 38. 247-263 (1998)
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[Publications] 遠藤麻美,小早川ゆり,浜田元輔,長船哲斉: "ユーグレナ細胞のLHCPIIタンパク質分子の輸送経路:塩化リチウムの効果"日本体育学会紀要. 29. 135-140 (1999)
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[Publications] T. Osafune, Y. Kobayakawa, E. Hase: "Immunogold localization of RuBisCo in developing plustids of dark grown wax-rich cell of Englcna"Ven. J. Electron Microscopy. 7. 13-15 (1999)
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[Publications] 長船哲斉,山田晃弘,猪俣吉広: "環境・生命の科学"弘学出版社. 205 (1999)
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[Publications] 長船哲斉,山田晃弘: "基礎生命の科学"弘学出版社. 85 (1999)