1999 Fiscal Year Annual Research Report
グラム陰性細菌のシグナルペプチド非依存型酵素分泌装置の解析と大量分泌への応用
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09650878
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
簗瀬 英司 鳥取大学, 工学部, 教授 (20158033)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡本 賢治 鳥取大学, 工学部, 助手 (80283969)
喜多 恵子 鳥取大学, 工学部, 助教授 (70234226)
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| Keywords | 分泌 / グラム陰性細菌 / シグナルペプチド非依存型酵素 / ABCエキスポーター / Zymomonas mobilis / レバンスクラーゼ / インベルターゼ / GSP |
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| Research Abstract |
昨年度までの研究において、醸造用細菌であるグラム陰性のZ.mobilisが菌体外に生産する2種のスクロース分解酵素、レバンスクラーゼ(SucZE2)とインベルターゼ(SucZE3)はN末領域に分泌シグナル様配列や疎水性アミノ酸領域をもたないことを明らかにした。すなわち、Z.mobilis細胞にはGSP機構とは異なる膜透過装置が存在していると推定し、レバンスクラーゼおよびインベルターゼの分泌生産能が低下した変異株(Z6C suc)を宿主として、これら酵素の分泌生産を相補する約1.7kbのEcoRV断片をZ.mobilis由来染色体DNAからクローニングした。このDNA断片上にはzliEとzliSと称した2つのORFが存在しており、zliEはレバンスクラーゼとインベルターゼの遺伝子の転写を活性化する因子(Transcriptional activator)であることを明らかにした。その解析過程で、1.7kb断片上のzliS領域が欠損することにより、レバンスクラーゼとインベルターゼがZ6C S2細胞内に蓄積される現象が観察された。これらの結果から、zliSはシグナルペプチド非依存型分泌酵素であるレバンスクラーゼとインベルターゼの分泌を促進する機能をもつと推定した。本年度は、(1)大腸菌内におけるzliSの機能解析、(2)Z.mobilis内におけるzliSの機能解析、(3)SucZE2およびSucZE3の分泌に関与する他の因子の検索、について検討した。
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[Publications] Y.Sakai,et al.: "A New carboxylesterase from Brevibacterium linens IFO12171 Responsible for the Convertion of 1,4-Butanediol Diacrylate to 4-hydroxybutyl Acrylate"Biosic.Biotechnol.Biochem.. 63・4. 688-679 (1999)
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[Publications] Y.Sakai,at al.: "Organization of the genes involved in the ribulose monophosphate pathway in an obligate methylotrophic bacterium,Methylomonas aminofaciens 77a"FEMS Microbiol.Letter. 176. 125-130 (1999)
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[Publications] H.Yanase: "Encyclopedia of Food Microbiology(Zymomonas)"ACADEMIC PRESS. 2372 (1999)
