1998 Fiscal Year Annual Research Report
植物病原菌由来のシグナル物質により発現が変動する宿主遺伝子の解析
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09660051
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
一瀬 勇規 岡山大学, 農学部, 助教授 (50213004)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白石 友紀 岡山大学, 農学部, 教授 (10033268)
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| Keywords | elicitor / suppressor / differential screening / transcription factor / DNA binding protein / Zn-finger protein / hsr 203 J / PR protein |
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| Research Abstract |
1. エリシターにより発現が誘導される遺伝子の単離と構造解析
differential hybridization法によって単離されたエリシター応答性遺伝子のcDNAのうち、PRタンパク質とS-adenosylmethionine(SAM)の関連酵素のcDNAについて全塩基配列を決定した。これらのcDNAは今後エンドウの防御応答を評価する分子マーカーとして用いることが可能である。hsr(hypersensitivity-related)203Jに相同性を示したE86はタンパク質を生産させた結果、エステラーゼ活性を有することが、明らかとなった。また、新規DNA結合性Zn fingerタンパク質のcDNA E84はAAAA(A)G配列に結合すること、この結合配列は既単離のエリシター応答性遺伝子であるPSPAL1,2やPSCHA1,2,3,4,5のプロモーターにも存在することが明らかとなった。
2. サブレッサーにより発現が誘導される遺伝子の単離と構造解析
differential hybridization法によって単離されたサブレッサー応答性遺伝子の20個の候補cDNAをナイロンメンブランにスポットし、サブレッサー5時間処理、エリシター5時間処理、水5時間処理、サブレッサーとエリシターの混合5時間処理及び、コントロールとして無処理の上胚軸から調製されたRNAから作成されたDIG-cDNAプローブを用いてドットブロットハイブリダイゼーションを行った。その結果、クローンS64の遺伝子発現は、サブレッサー単独及びサプレッサーとエリシターの混合処理区においてのみ増高した。また、ノーザン解析によってもS64はドットプロットでの発現パターンが再現された。S64の全塩基配列を現在決定している。
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[Publications] Ichinose et al.: "Cis-reguiatory elements and trans-acting factors involved in the activation of a member of elicitor-responsive pea chalcone synthase gene family,PSCHS2." Sci.Rep.Fac.Agric.Okayama Univ.87. 91-97 (1998)
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[Publications] Seki et al.: "Changes in in vivo DNA-protein interactions in pea phenylalanine ammonia-lyase and chalcone synthase gene promoter induced by fungal signal molecules." Plant Cell Physiology. 40(1). 88-95 (1999)
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[Publications] Sriprasertsak et al.: "Expression of the chimeric pea PSPAL2 promoter in transgenic tobacco in response to fungal ingress and injury." Ann.Phytopathol.Soc.Japan. 65(in press). (1999)
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[Publications] Ichinose et al.: "Molecular cloning of a cDNA encoding a putative DNA-binding zinc-finger protein in pea" Sci.Rep.Fac.Agric.Okayama Univ.88. 25-30 (1999)
