1999 Fiscal Year Annual Research Report
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09660100
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| Research Institution | Fukui Prefectural University |
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Principal Investigator |
中森 茂 福井県立大学, 生物資源学部, 教授 (00254243)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
和田 大 福井県立大学, 生物資源学部, 助手 (00301416)
高木 博史 福井県立大学, 生物資源学部, 助教授 (50275088)
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| Keywords | 含硫アミノ酸 / システイン / メチオニン / 大腸菌 / トリプトファナーゼ / アンチセンスDNA |
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| Research Abstract |
1,大腸菌のシステイン分解酵素の同定
システイン生産性の更なる向上のため、昨年度造成したシステイン分解低下大腸菌JM39-8株の解析を行った。
(1)大腸菌においてシステイン分解に関与する主な酵素2つを同定し、1つはシスタチオニンβリアーゼ、もう1つはトリプトファナーゼであることを示した。
(2)トリプトファナーゼがシステインによって誘導されることをはじめて明らかにした。
(3)JM39-8株は、トリプトファナーゼの活性が低下した株であることを明らかにした。
(4)トリプトファナーゼ欠損株はJM39-8株と同等程度のシステイン生産性を示した。
以上の結果から、システインの分解にトリプトファナーゼが寄与していると考えられた。
2,メチオニン生産性の改善
アンチセンスDNA法を用いてスレオニン生合成経路のhomoserine kinaseの発現量低下を試みた。Homeserine kinaseをコードする遺伝子ThrBのアンチセンスDNAをもつプラスミドを構築し、昨年度造成したメチオニン生産大腸菌に導入した。その結果メチオニンの生産量は増加しなかったが、生産速度が速くなる傾向が認められた。
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[Publications] Hiroshi Takagi ほか: "PCR random mutagenesis into Escherichia coli serine acetyltransferase"FEBS Letters. 452. 323-327 (1999)
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[Publications] Shigeru Nakamori ほか: "Mechanism of L-methionine overproduction by Escherichia coli :"Applid Microbiology and Biotechnology. 52. 179-185 (1999)
