化学物質誘発腎糸球体障害における細胞外基の動態に関する研究

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09660346
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Azabu University
• Principal Investigator: 代田 欣二 麻布大学, 生物科学総合研究所, 助教授 (70147974)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 代田 眞理子 (財)食品薬品安全センター秦野研究所, 生殖生物学研究室, 研究員 ; 藤瀬 浩 麻布大学, 獣医学部, 教授 (40106232)
• Keywords: 腎臓 / 糸球体硬化 / 細胞外基質

Research Abstract

6週齢、雄のF344ラットに、抗癌剤ジノスタチン・スチマラマ-(ZS)を単回静脈投与し、糸球体の荒廃過程を投与後5〜25週まで観察した。投与後5週より糸球体メサンギウムの浮腫とmesangiolysisが頻繁に認められた。10週からは一部の糸球体にIV型コラーゲンの増加、III型コラーゲンの形成が認められた。15週後には病変が進行し糸球体の腫大が顕著になった。20〜25後語の腎臓では、IV型コラーゲンの増加のため硬下した糸球体、IV型コラーゲンの増加に加えIII型コラーゲンの出現を伴う糸球体mesangiolysisを示す糸球体が混在して認められた。M細胞におけるα-平滑筋アクチン(α-SMA)の発現を、メサンギウム細胞(M細胞)の形質転換の指標として観察したところ、非投与コントロール(Cr)ラットにはα-SMAの発現はほとんどなく、ZS投与ラットではM細胞の形質転換が5週後より認められ、以後糸球体における形質転換細胞数と陽性領域が広範となった。一糸球体当りのED-1陽性細胞の数は、すでに投与後5週よりCrラットと有意差を認め、15週後にピークに達した。ED-1陽性細胞の糸球体における推移はM細胞の形質転換の経時的変化とほぼ相関していた。また、糸球体内増殖細胞核抗原陽性細胞も投与後5週よりCrラットと有意差を認め、10週後にピークに達し、以後漸減した。以上から、本モデルではメサンギウムの崩壊と共にED-1陽性細胞の浸潤とM細胞の形質転換が起り、それ以後IV型やIII型コラーゲンなどの細胞外基質が蓄積することが明らかになった。また、この進行過程には、糸球体局所における単球/マクロファージと糸球体細胞、特にM細胞の相互作用が重要であることが示唆された。この他、腎臓全体からRNAを抽出しRT-PCRによりIV型コラーゲンやパールカンのmRNAを定量化する方法を検討した。