1997 Fiscal Year Annual Research Report
動脈系化学受容器におけるペプチド性神経支配の三次元的解析ならびにその分子機構
Project/Area Number |
09670022
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Research Institution | Yokohama City University |
Principal Investigator |
日下部 辰三 横浜市立大学, 医学部, 講師 (80117663)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
尾野 道男 横浜市立大学, 医学部, 助手 (50264601)
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Keywords | 頸動脈小体 / ハイポキシア / 免疫組織化学 / ペプチド性神経支配 / 三次元構築 / 細胞内セカンドメッセンジャー / 細胞内カルシウム |
Research Abstract |
1.免疫組織化学的検討:Isocapnic hypoxia(10%O_2,3.0-4.0%CO_2)に3ヶ月暴露されたラット頸動脈小体は血管の著しい拡張に伴いその容積は増大し、低酸素暴露の影響が十分に確認された。各種神経ペプチド(SP,CGRP,VIP,NPY)に対する抗体で免疫染色し、その分布密度を正常環境群と長期間低酸素暴露群で比較すると、化学受容細胞および血管周囲に分布するSPおよびCGRP陽性線維には大きな変化は認められなかったが、VIPおよびNPY陽性線維は約2-4倍に増加した。 2.共焦点レーザー顕微鏡による検討:上記免疫組織化学的検討で使用した切片より数倍厚い切片を共焦点レーザー顕微鏡で観察し、さらに、SP,CGRP,VIPおよびNPY陽性線維の三次元構築像をステレオ観察した。特に、長期間低酸素暴露群のVIPおよびNPY線維は血管周囲に沿って走行する様子が立体的に把握することが出来た。 3.細胞内セカンドメッセンジャーおよびリン脂質(PI)代謝経路関連物質投与による生理応答の検討:未固定ビブラトーム切片を作成し、cAMP系に関してはフォルスコリンおよび膜透過性cAMPの投与を行い細胞内小器官の運動の変化を正常環境群と長期間低酸素暴露群で比較した。一方、IP3系に関しては、PLCのアゴニストの投与、また、ジアニルグリセロール系に対してはTPA、OAG、H7等のCキナーゼ関連物質を用い検討した。実験手技の困難さに依るところが大であると思われるが、目下のところ低酸素暴露群では個体差が著しく例数を重ね検討中である。 4.化学受容細胞内のカルシウム測定:未固定ビブラトーム切片を作成し、化学受容細胞内のカルシウムをfura2を用いて顕微蛍光測定した。低酸素暴露群ではやや高い傾向を示した。
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[Publications] T.Kusakabe: "Distribution of neuropeptide-containing nerve fibers in the human submandibular gland,with special reference to the difference between serous and mucoous acini." Cell Tissue Res.288. 25-31 (1997)
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[Publications] H.Matsuda: "Pepidergic innerevation in human von Ebner's gland:an immunohistochemical study." Acta Otolaryngol.117. 447-451 (1997)
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[Publications] Y.Hashimoto: "Effect of dibutyryl cyclic AMP on axoplasmic transport in the hippocampus." Brain Res.755. 343-346 (1997)
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[Publications] H.Matsuda: "Neuropeptide-containing nerve fibers in the human parotid gland:semiquantitqtive analysis using an antiserum against protein gene product 9.5." Histochem.J.29. 539-544 (1997)
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[Publications] T.Kawakami: "Distribution of neuropeptide-containing nerve fibersin the salamander taste organs." Histol.Histopathol.13. 115-119 (1998)
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[Publications] T.Kusakabe: "Distribution of VIP receptors in the human submandibular gland:an immuno-histochemical sarudy." Histol.Histopathol.(in press). (1998)
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[Publications] T.Ichikawa: "Distinct effects of tetragastrin,histamine,and CCh on rat gastric mucin synthesis and contribution of NO." Am.J.Physiol.274. G138-G146 (1998)
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[Publications] T.Kusakabe: "Transient appearance of substance P-like immunoreactivity in the granular convoluted tubules of the male mouse submandibular gland:light and electron microscopic studies." Cell Tissue Res.(in press). (1998)
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[Publications] H.Matsuda: "Distribution of substance P-and calcitonin-gene related peptide-containing nerve fibers in the nasal mucosa of chronically hypoxic rats." Brain Res.Bull.(in press). (1998)
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[Publications] Y.Gono: "Regional differences in the distribution of gastrin,somatostatin,and serotonin immunoreactive basal granulated cells in the rat stomach:a quantitative analysis using antisera against protein gene product 9.5 and gastric mucins." Biomed.Res.(in press). (1998)
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[Publications] T.Kusakabe: "Immunohistochemical localization of regulatory neuropeptides in the human circumvallate papillae." J.Anat.(in press). (1998)
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[Publications] T.Takenaka: "Signal transduction mechanisms and metabolic regulation of axoplasmic transport in superior cervical ganglion cells.(In:Pain Mechanisms and Management" S.N.Ayrapetyan and A.V.Apkarian,IOS Press, (1998)