1997 Fiscal Year Annual Research Report
小腸細胞性レチノール結合たんぱく質TypeIIの遺伝子発現と生理作用に関する研究
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09670074
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | University of Shizuoka |
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Principal Investigator |
高瀬 幸子 静岡県立大学, 食品栄養科学部・栄養学科, 教授 (10046196)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
合田 敏尚 静岡県立大学, 食品栄養科学部・栄養学科, 助手(学内講師) (70195923)
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| Keywords | 細胞性レチメール結合たんぱく質II / mRNA / レチノイドレセプター(RXR) / PPAR / Caco-2細胞 |
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| Research Abstract |
1.脂肪酸代謝関連核内レセプターPPARの活性化を主体とするCRBP(II)遺伝子発現のin vitro証明:
レチノイドXレセプター(RXR)はsilentに働き、食事由来の脂肪酸によるペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体PPARαの活性化が主力となって細胞性レチノール結合タンパク質タイプII(CRBP(II))の転写活性化を、Caco-2細胞を用いたin vitro実験系による証明を試みた。Caco-2細胞をアラキドン酸アナログのETYAで処理するとCRBP(II)遺伝子の転写が促進されることにつきrun on assayにより精度の高い証明が得られ、前回報告のアクチノマイシンD処理による結果と一致した。現在、CRBP(II)のプロモーターにレポーター遺伝子を結合させた発現ベクターならびに、RXRαとPPARαの発現ベクターをCaco-2細胞に導入しcontransfectionを行っており、間近く完成する見通しであるが、計画より遅れている。
2.CRBP(II)の転写調節因子となるPPARを活性化する脂肪酸とその代謝誘導体の探索:
CRBP(II)遺伝子発現にはPPARαの関与が考えられ、そのPPARαの標的リガンドの探索を試みた。脂肪酸からプロスタノイドへの代謝の阻害剤と、ペルオキシゾーム増殖因子により活性化する情報伝達経路に関する阻害剤として、ABT(ω酸化の選択的阻害剤)とインドメタシン(シクロオキシゲナーゼの阻害剤)の影響を調べた。Caco-2細胞のCRBP(II)mRNA増大はABTにより抑制されたが、インドメタシンは抑制されなかった。高脂肪食摂食ラットの空腸CRBP(II)mRNA量はABTやインドメタシンにより低下傾向を示した。CRBP(II)mRNAは脂肪酸の代謝産物ではなく、取り込まれる脂肪酸により発現誘導されることが明かとなった。
3.ラット小腸におけるCRBP(II)とFABP遺伝子発現量の日内変動:
食事中の脂肪含量に関係なく、ラット空腸CRBP(II)mRNA量に日内変動が存在していた。核run on assayによりCRBP(II)mRNAの転写速度にも日内変動があることがわかった。
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[Publications] Suruga,Kazuhito, et al: "Cloning of chick cellular retinol-binding protein,type II and comparison to that of some mammals:espression of the gene at different developmental stages,and possible involvement of RXRs and PPAR." Comparative Biochemistry and Physiology. 118A. 859-869 (1997)
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[Publications] Suzuki,Rie, et al: "Peroxisome proliferator enhances gene expression of cellular retinol-binding protein,type II in Caco-2 cells." Life Sciences. 62. 861-871 (1998)
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[Publications] Takase,Sachiko, et al: "Dietary fatty acids are possible key determinants of cellular retinol-binding protein II gene expression." American Juornal of Physiology. (in press). (1998)
