遺伝子治療技術による単純ヘルペスウイルス感染に対する経口ワクチンの開発

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09670238
• Research Institution: Teikyo University
• Principal Investigator: 入江 宏 帝京大学, 医学部, 助教授 (50160073)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宮澤 正顕 近畿大学, 医学部, 教授 (60167757)
• Keywords: 単純ヘルペスウイルス / 経口ワクチン / 遺伝子治療 / エビトープ

Research Abstract

マウスに生の単純ヘルペスウイルス(HSV-1)を経口投与すると感染することなく、HSV-1に対する体液性および細胞性の免疫が成立し、粘膜面にIgA主体の抗体を生じ理想的なワクチンの作用がある。経口投与後胃内で分解されたHSV-1の免疫原は腹腔感染の免疫原に比較してwestern blotでみるとbandsの数が少なく、認識部位は約130Kと64Kのサイズのbandであることが判明した。bandsを切り出しマウスを免疫し、抗体価の上昇をチェックし、HSV-1の致死的なchallengeをした。未処置のマウスはchallenge後死亡したが、130Kのbandと64Kのbandで免疫したマウスでは各々約50%、40%のマウスが生存した。さらに、それぞれのbandで免疫したマウスの牌細胞からハイブリドーマを作製し、単クローン抗体を得た。一方、感染細胞から抽出したm-RNAからC-DNAをつくり発現ベクターに入れて大腸菌に感染させ、蛋白を発現させてニトロセルロース膜上で単クローン抗体と反応させ180Kのbandと64Kのbandの同定を行った。その結果64KのbandはHSV-1のglycoprotein Dであることが判明した。130Kのbandは解析しえなかったが(原因が良く分からない)、おそらくglycoprotein Bである。
同時に行っているSCIDマウスにimmunocompetent Balb/cマウスの脾細胞を移入し、HSV-1を経口接種し粘膜免疫を再構築する際にSCIDマウスが獲得する抗体もglycoprotein Dに対するもので感染抵抗性が見られた。経口免疫においてglycoprotein Dは重要な鍵となるものであることが判明した(この研究はAIDS患者におけるHSV-1の経口ワクチンの適応を考えた研究であり、1998年の国際ヘルぺスワークショップで賞を受賞した)。

Research Products

• [Publications] 入江 宏: "単純ヘルペスウイルス経口ワクチン開発にむけて" 医学のあゆみ. 179. 138-139 (1996)
• [Publications] 入江 宏: "遺伝子治療技術による単純ヘルペスウイルス経口ワクチン開発にむけて" 帝京医学雑誌. 20. 347-356 (1997)
• [Publications] Irie,H.et al: "Heroes simplex virus hepatitis in macrohage-depleted mice:the role of massive,apoptotic cell death in pathogenesis" J.Gen.Virol. 79. 1225-1231 (1998)
• [Publications] Irie,H.et al: "Engineering of a novel oral herpesvirus vaccine using gene therapy" Bioscience Microflora. 17. 33-40 (1998)
• [Publications] Koyama,H.et al: "Role of virus-induced apoptosis in a host defense mechanism aginst infection" J.Med.Invest.45. 37-45 (1998)