1997 Fiscal Year Annual Research Report
マクロファージのNO合成酵素及びサイトカイン遺伝子の発現調節性寄生虫因子の研究
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09670259
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
福本 宗嗣 鳥取大学, 医学部, 助教授 (60111126)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平井 和光 鳥取大学, 医学部, 教授 (20093940)
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| Keywords | マイソン裂頭条虫 / マクロファージ / 一酸化窒素合成酵素 / chemokine / TNF-α / 遺伝子発現 / Northern Blot / 寄生虫 |
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| Research Abstract |
マウスの腹腔マクロファージをマイソン裂頭条虫擬充尾虫とin vitroでco-cultureし,lFN-γやLPSを添加すると擬充尾虫を加えていないマクロファージに比較し,一酸化窒素合成酸素(iNOS)の遺伝子発現の抑制が認められた.そこで,この擬充尾虫がマクロファージのchemokine(IP-10,KC,JE/MCP-1)やTNF-αの遺伝子発現に及ぼす影響についてNorthern Blot分析によって検討した.1×10^γのマウス腹腔マクロファージを10mlのDMEMで培養し,LPS(100ng/mI)と同時に5隻の擬充尾虫を添加した場合,3時間後のlP-10とJEの発現抑制比率はそれぞれ38.1%,16.8%で,6時間後は51.3%,44.9%とより顕著に抑制された.また,マクロファージの培養液中に擬充尾虫のみ加えて1-6時間培養した後にLPSを添加すると,擬充尾虫とのco-cultureの時間が長いほどlP-10とJEの遺伝子発現の抑制比率は高かった.また,TNF-αはIP-10やJEと類似に抑制も認められた.このように,擬充尾虫はiNOSだけでなくchemokineやTNF-αの遺伝子発現も抑制することが明らかになった.
次に,マウス腹腔マクロファージをlFN-γとLPS刺激する前に擬充尾虫の分泌・排泄物質(ES)を添加し,マクロファージの遺伝子発現に及ぼす影響について検討した.iNOSmRNAの発現はES添加後のpre-incubation時間が長いほど抑制が顕著で,24時間では抑制比率は82.6%であり,nitriteの産生は86.8%抑制された.また,JEもiNOSと同様の抑制傾向を示した.ESを24時間作用させたマクロファージでは,ES除去72時間後でもnitriteの産正は80%以上抑制されていた.さらに,24時間マクロファージに作用させたESを含む培養液を新たなマクロファージに作用させると,nitrite産生の抑制効果はかなり維持されていた.これらの結果から,この抑制因子は非常に安定な物質であり,in vivoでも十分機能することが推察された.
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[Publications] Soji Fukumoto: "Excretory/secretory products from plerocercoids of Spirometra erinacei reduce iNOS and chemokine mRNA levels in peritoneal macrophages stimulated with cytokines and/or LPS." Parasite Immunology. 19・7. 325-332 (1997)
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[Publications] Haoran Wang: "Excretory/secretory products from plerocercoids, of Spirometra erinaceieuropaei induce the expression of inducible nitric oxide synthase mRNA in murine hepatocytes." International Journal for Parasitology. 27・4. 367-375 (1997)
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[Publications] Haoran Wang: "Transient expression and regulation of inducible nitric oxide synthase gene in primary cultured adult murine hepatocytes." The Japanese Journal of Pharmacology. 75・Suppl.I. 84- (1997)
