トキソプラズマ感染細胞におけるシャベロン、トランスポーターの抗原提示機能の解析

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09670264
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 青才 文江 千葉大学, 医学部, 講師 (80150316)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 矢野 明彦 千葉大学, 医学部, 教授 (20135122)
• Keywords: 表面プラズモンレゾナンス / トキソプラズマ / シャベロン / H_<SP>70 / MHC-ペプチド複合体 / トランスポーター / 抗原提示細胞

Research Abstract

我々はトキソプラズマ感染細胞のトキソプラズマ抗原提示機構について研究を進めており、今迄にトキソプラズマ感染細胞がトキソプラズ抗原を細胞内で抗原処理し、MHCクラスIあるいはクラスII分子結合オリゴペプチド抗原として感染細胞特異的CD8^+細胞傷害性T細胞(CTL)、CD4^+増殖性T細胞、或いはCD4^+CTLに抗原提示することを明らかにして来た。本年度は更に、表面プラズモンレゾナンスにより、HLA-A2分子への9-mer合成トキソプラズマSAG1抗原ペプチドの結合性を解析し、HLA-A2分子に強い結合性を示したSAG1 289-297ペプチドが感染細胞特異的CD8^+CTLに対し強い抗原性を示すT細胞エピトープであることを明らかにして報告した(Biochem. Biophysi.Res.Commun.236:257-261,1997)。
また、以上の研究背景を基に、細胞内蛋白質のフォールディング、オリゴマー形成や、分子の膜貫通・移動などの抗原提示機序に不可欠な分子群と考えられる分子シャベロンの解析を進め、トキソプラズマ感染ヒトメラノーマから得た熱ショック蛋白質H_<SC>70が感染細胞特異的CTLのエピトープとなることを報告した(Microbiol.Immunol.41:553,1997)。
現在、トキソプラズマ感染宿主細胞内における抗原提示分子としてのシャベロントランスポーターの抗原処理・提示機能の分子論的解析を目的としてT_<ap>トランスポーター欠損変異細胞株RMA.SとWild株にヒト及びトキソプラズマH_<sp>70(H_<sc>70)遺伝子を導入し、H_<sp>70(H_<sc>70)抗原提示能の比較解析を進めている。既にリコンビナント・ヒトH_<sc>70、ヒトH_<sc>70に対するモノクローナル抗体、およびリコンビナント・トキソプラズマH_<sp>70を作製済みである。RSA.Sは強い抗原提示能をもち、遺伝子導入抗原提示細胞株による細胞性免疫反応誘導を目的としたワクチン開発を考えている。

Research Products

• [Publications] Yang., T-H., Aosai,F., Norose,K., Mun,H-S. and Yano,A.: "Hert shock cognate protein 71-associated peptidess function as an epitope for T.gondii-specific CD4_+CTL." Microbiol.Immunol.41. 553-561 (1997)
• [Publications] He,N., Aosai,F., Mun,H-S., Sekiya,S. and Yano,A.: "Cytokine production assayedby RT-PCR in pregnant mice infected by Toxoplasma gongii as a model of congenital toxoplasmosis." Jpn.J.Trop.Med.Hyg.25. 59-67 (1997)
• [Publications] Yano,A., Aosai,F., T-H., He,N., Mun,H-S., Liu,H., Inoko,H. and Norose,K.: "Correlation between direct binding ability of synthetic T.gondii SAG1peptides to HLA-A2 measured by a sensor plasmon reasonance and antigenicity of peptides for T.gongii-induced cell-specific CTL" Biochemical and Biophysical reseach communications. 236. 257-261 (1997)
• [Publications] He,N., Aosai,F., Luo,W-T., Ueda,M., Yang,T-H., Yamashita,K., Sekiya,S. and Yano,A.: "Parasite load in pregnant mice infected by Toxoplasma gondii assayed by quantitative-competitive-PCR." Parasitology International. 46. 143-147 (1997)
• [Publications] Luo,W-T., Aosai,F., Ueda,M., Yamashita,K., Shimizu,K., Sekiya S. and Yano,A.: "Kinetics in parasite abundance in susceptible and resistant mice infected with an avirulent strain of Toxoplasma gondii by using quantitative competitive PCR." J.Parasitol.83. 1070-1074 (1997)
• [Publications] 矢野明彦、青才文江: "原虫感染における抗原提示、日本における寄生虫学の研究 日本寄生虫学会編" (印刷中),
• [Publications] 矢野明彦、青才文江、野呂瀬一美: "原虫感染症とサイトカイン、感染症とサイトカイン 今西二郎、笹田昌孝編" 医療ジャーナル, 19 (1998)