ABO抗原合成酵素蛋白の三次元構造抽出に基づく抗体作製戦略

1998 Fiscal Year Final Research Report Summary

• Project/Area Number: 09670432
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Legal medicine
• Research Institution: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• Principal Investigator: 滝澤 久夫 富山医科薬科大学, 医学部, 教授 (90171579)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 畑 伸秀 富山医科薬科大学, 医学部, 教務職員 (40208509) ; 島田 一郎 富山医科薬科大学, 医学部, 助手 (20272908) ; 小湊 慶彦 富山医科薬科大学, 医学部, 講師 (30205512)
• Project Period (FY): 1997 – 1998
• Keywords: ABO bioodgroup genes / Glycosylransferase / Promoter assay / DNA polymorphism / DNA methylation / tissue-specific exptreeion / PCR / CpG island

Research Abstract

我々はこれまでにABO式血液型抗原の合成に関与する糖転移酵素について抗酵素抗体を作製し、酸素蛋白の免疫学的特徴を明らかにしてきた。一方、糖転移酵素の三次元構造の解析には、アミノ酸配列、基質構造と酵素反応の活性中心等の特定、糖転移酵素蛋白のX線解析像等が重要な情報になる。これまでに様々なABO式血液型抗原の対立遺伝子の酵素蛋白のアミノ酸配列と酵素活性の関係が調べられているが、X線解析像を得るために精製された酵素蛋白質を多量に作製することは出来ていない。しかし、我々はこの研究期間内にABO式血液型遺伝子の転写制御について以下のような重要な事項を明らかに出来た。即ち、(1)ABO遺伝子の転写はcap site-CpG islandのmethylationによって抑制され、脱methylationによって促進する (2)転写開始点の上流3.2kbから4.0kbの領域には43bpを単位とする繰り返し領域があり、これが転写活性を増強する (3)この繰り返し数が1回のものは、A遺伝子と連鎖し、4回のものはBあるいはO遺伝子と連鎖している。

Research Products

• [Publications] Kominato Y.、Takizawa H.et.al.: "Transcription of Human ABO Histo-Blood Group Genes is Dependent upon Binding of Transcription Factor CBF/NF-Y to Minisatellite Sequence."Journal of Biological Chemistry. 272(38). 25890-25898 (1997)
• [Publications] Tsukada J.、Kominato Y.、et.al.: "Human T-cell leukemia virus type I Taxtransactivates the promoter of human prointerleukin-1 β gene through association with two transcription factors、NF-IL6 and Spi-1."Blood. 90(8). 3142-3153 (1997)
• [Publications] 小湊慶彦: "遺伝子分析による血液型判定の進歩"日本法医学雑誌. 54(4). 367-375 (1997)
• [Publications] 滝澤久夫: "ABO式血液型の研究"日本法医学雑誌. 52(5). 265-276 (1998)
• [Publications] 小湊慶彦: "乳幼児の血液型判定を行う際の注意点"日本医事新報. 3874. 159-160 (1998)
• [Publications] Yamamoto M.、Kominato Y.、Yamamoto F.: "Phage display cDNA cloning of protein with carbohydrate affinity."Biochemical and Biophysical Research Communications. 255. 194-199 (1999)
• [Publications] Kominato Y.、Takizawa H.、et.al.: "Expression of human histo-blood group ABO gens is dependent upon DNA methylation of the promoter region."Journal of Biological Chemistry. 274. 37240-37250 (1999)
• [Publications] Shimada I.、Takizawa H.、et.al.: "Dna polymorphisms in the 5-flanking sequence of human ABO blood group genes and their association with the alleles for the common ABO phenotypes."Legal Nedicine. 1. 217-225 (1999)
• [Publications] Takizawa H.、et.al.: "Progress in the study of ABO blood group system."Legal Nedicine. 2. 1-6 (1999)