1997 Fiscal Year Annual Research Report

C型肝炎の肝障害機序の検討と新しい予防・治療法の開発

Research Project

Project/Area Number	09670581
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Research Institution	Tokyo Women's Medical University
Principal Investigator	徳重克年東京女子医科大学, 医学部, 助手 (60188729)
Keywords	HCV / アポトーシス / Cytotoxic T細胞 / DNAワクチン / IL-2
Research Abstract	すでに我々は、HCV core蛋白を持続的に発現した肝細胞癌株の樹立を報告したが、これらのHCV core蛋白発現細胞株は、親株と比較し細胞増殖速度の低下を認めたが、そのままではアポトーシスをおこさなかった。一方、C型肝炎患者で肝細胞上のFas抗原の発現増強、及びFas Ligandを発現したCytotoxic T cellの増加が報告されており、C型肝炎におけるFas-Fas-Ligand系を介したアポトーシスの働きが重要しされている。これらの事実に基ずき、HCV core蛋白のFas-Fas-Ligand系を介したアポトーシスへの影響に関して検討した。その結果、抗Fas抗体を加えると、HCV core蛋白発現細胞株のみ有意にアポトーシスが認められた。しかし、両者間にFas抗原の発現に明らかな差は認められなかった。以上の事実より、HCV core蛋白が直接細胞にダメ-ジを与えないまでも、Fasを介したアポトーシスを増強させることが明らかとなった。現在アポトーシス関連遺伝子、分子に関して検討中である。次に、治療、ワクチン開発に関してであるが、我々はすでにHCV core遺伝子を用いたDNAワクチンを開発し、マウスにおいてHCVに対するCytotoxic T細胞の誘導に関して成功している。しかし、従来の方法では、Cytotoxic活性は強くなく2.0%前後であった。この原因は、HCV core蛋白が非分泌型の蛋白で、CD4Tを誘導できずに最終的にCytotoxic T細胞も効果的に誘導できないためと考えられた。そこで、Cytotoxic T細胞の誘導を助けるサイトカイン(IL-2,IL-4,GM-CSF)のDNAワクチンを併用したところ、HCV coreとIL-2のDNAワクチンの併用によってin vitro cytotoxic活性が50%と飛躍的に上昇した。今後は、この手法でDNAワクチンを接種したマウスに、HCV core蛋白を発現した同種の腫瘍細胞を投与し、in vivoにおけるCytotoxic T細胞の誘導能を検討する予定である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] K.Tokushige: "Comparison between cytomegalorirus promoter and elongation facter 1 & promoter congtructs in the cscablishment of cell lines expressing heparirisc virua core protein" Journal Virological Method. 64. 73-80 (1997)
[Publications] M.Geissler: "Enhancement of cellular and humoral imnune responsc to hepatiris C Virus (HCV) core procein using DNA based vaccines augmented with cytokine expressing plasmids." Journal Immjnology. 158. 1231-1237 (1997)
[Publications] M.Geissier: "Cellualar and humoral immune response to hepatitis B virus struetual proteins in mice after DNA-based immunization" Gastroenterology. 112. 1307-1320 (1997)
[Publications] T.Wakita: "Antisense RNA effect on hepatitis C virus RNA translation invitro and cell culture" Journal Medical Virology. (In press).
[Publications] K.Tokushige: "Viral Superantigen" CRC press(edited by K.Tomonari), (1997)
[Publications] 徳重克年: "門脈圧亢進症-基礎から診断,治療まで-" 新興医学出版社(印刷中),

1997 Fiscal Year Annual Research Report

C型肝炎の肝障害機序の検討と新しい予防・治療法の開発

Principal Investigator

徳重 克年 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (60188729)

Research Products

[Publications] K.Tokushige: "Comparison between cytomegalorirus promoter and elongation facter 1 & promoter congtructs in the cscablishment of cell lines expressing heparirisc virua core protein" Journal Virological Method. 64. 73-80 (1997)

[Publications] M.Geissler: "Enhancement of cellular and humoral imnune responsc to hepatiris C Virus (HCV) core procein using DNA based vaccines augmented with cytokine expressing plasmids." Journal Immjnology. 158. 1231-1237 (1997)

[Publications] M.Geissier: "Cellualar and humoral immune response to hepatitis B virus struetual proteins in mice after DNA-based immunization" Gastroenterology. 112. 1307-1320 (1997)

[Publications] T.Wakita: "Antisense RNA effect on hepatitis C virus RNA translation invitro and cell culture" Journal Medical Virology. (In press).

[Publications] K.Tokushige: "Viral Superantigen" CRC press(edited by K.Tomonari), (1997)

[Publications] 徳重 克年: "門脈圧亢進症-基礎から診断,治療まで-" 新興医学出版社(印刷中),

徳重克年東京女子医科大学, 医学部, 助手 (60188729)

[Publications] 徳重克年: "門脈圧亢進症-基礎から診断,治療まで-" 新興医学出版社(印刷中),