TS調節機構を修飾するbiochemical modulation の研究

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09670591
• Research Institution: Japanese Foundation For Cancer Research
• Principal Investigator: 相羽 恵介 癌研究會, 癌化学療法センター臨床部, 副部長 (90150086)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 俊二 癌研究會, 癌化学療法センター臨床部, 研究員 (90221358) ; 伊藤 良則 癌研究會, 癌化学療法センター臨床部, 研究員 (00261131) ; 堀越 昇 癌研究會, 癌化学療法センター臨床部, 部長 (00085648)
• Keywords: TS / RNA / biochemical modulation

Research Abstract

1)RNA-Protein binding assay;Gel mobility shift assayを用い、ActinをコントロールとしてTS mRNAと蛋白質の結合力を検索した。前年度までの研究ではヒトTS蛋白自身がTS mRNAとの結合力が最も強く、葉酸代謝拮抗物質のZD1964、やZD9553に強い結合力が認められた。本年度は5-FU,DFUR,tomudex等のTS抑制型抗癌剤とTS mRNAの結合力を検討した。しかしこれらの抗癌剤ではTSmRNAとの結合は認められなかった。2)In vitro translation ;ZD1694、ZD9553はIn vitro translationにて TS発現力を強く抑制した。時間的検討では1時間、4時間、12時間、24時間接触を試みた。12時間接触でZD1694が最もTS発現を抑制した。3)MTT assay; ヒト大腸癌細胞株SNUC-4を用いZD1694,ZD9553のIC10の濃度で5-FUの抗腫瘍効果の増強を検討した。ZD9553併用24時間接触で12倍,ZD1694併用では3倍の抗腫瘍効果の増強を認めた。4)TS activity assay,TS biding assay5-FUとZD1694,ZD9553併用12時間接触にてTS抑制率を検討した。総TS量は増加せず。TS抑制率は70%まで低下した。よってこれらのBCMの機序はTS増加の抑制と考えた。

Research Products

• [Publications] Aiba K,: "Detection and quantitation of thymidylate synthase mRNA in human colon adenocarcinoma cell line resistant to 5-fluorouracil by competitive PCR." Anticancer Res. 18. 1457-1464 (1998)
• [Publications] Aiba K.: "Effects of Systemic and Regional Chemotheraphy After Hepatic Resection for Colorectal" Annals of Surgical Oncology. 5(8). 706-712 (1998)
• [Publications] 相羽恵介: "S-1, Tomudex, Capecitabine" 癌の臨床. 43(8). 826-835 (1997)
• [Publications] Aiba K.: "Recent advance in chemotherapy for colorectal cancer." Jpn J Cancer Chemother. 23. 535-548 (1996)
• [Publications] Aiba,K.: "Estimation of pathways of 5-fluorouracil anabolism in human cancer cells in in vitro and in vivo." Jpn J Cancer Chemother. 23. 721-731 (1996)
• [Publications] Aiba K: "Thymidylate synthase gene amplification in human colon cancer cell lines resistant to 5-fluorouracil." Biochem Pharm. 49. 1419-1426 (1995)
• [Publications] 相羽恵介: "代謝拮抗物質、Yellow Book3抗癌剤." 高橋隆一総監修、小川一誠監修. 東京ミクス, 57 (1998)
• [Publications] 相羽恵介: "Biochemical modulation、メディカル用語ライブラリー." 垣添忠生・関谷剛男編. 羊土社, 3 (1996)