TS調節機構を修飾するbiochemical modulationの研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09670591
• Research Institution: Japanese Foundation For Cancer Research
• Principal Investigator: 相羽 惠介 財団法人 癌研究会, 癌化学療法センター・臨床部, 副部長 (90150086)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 俊二 財団法人 癌研究会, 癌化学療法センター・臨床部, 研究員 (90221358) ; 伊藤 良則 財団法人 癌研究会, 癌化学療法センター・臨床部, 研究員 (00261131) ; 堀越 昇 財団法人 癌研究会, 癌化学療法センター・臨床部, 部長 (00085648) ; 水沼 信之 財団法人 癌研究会, 癌化学療法センター・臨床部, 研究員 (40311229)
• Keywords: TS / RNA / Biochemical modulator / p53

Research Abstract

TS阻害効果の向上を目指したBiochemical modulationの検討
1)p53発現とTSとの相互関係
抗癌剤の効果発現とp53の関連性は特にアポトーシス誘導の観点より従来検討されてきた。同じTS阻害剤でも5-FUはp53wild依存性であり、一方Tomudexは非依存性である。RNA gel shift assayによりTS蛋白とp53mRNAの蛋白コード部位は特異的相互関係にあることが判明した。そしてTS蛋白がp53mRNAの翻訳を特異的に抑制していることが判明した。これはp53遺伝子発現の新たな調節経路であり、TS蛋白の新たな細胞内機能の理解を促すとともに有効な癌治療開発を目指したい。
2)In vitro translation
Tomudex,ZD9331などを用いてIn vitro translationにおけるTS蛋白合成に及ぼす影響を検討した。TS発現力を強く抑制した。このことからはTomudexはmRNA以降でTS発現を抑制し、耐性を打破する可能性があると考えられた。
3)MTT assay
ヒト大腸癌細胞株を用いTomudex, ZD9331,ZD9553のmodulatorとしての可能性をIC_<10>の濃度にて検討中である。同時にTS阻害に及ぼす影響をTS catalytic activity assay, ligand binding assayを用いて検討中である。

Research Products

• [Publications] Mizunuma N.,et al.: "In vitro selection of a high-affinity RNA sequence that serves as a Thymidylate synthase-rasponse enhancer element"J.Nucreic Acids. (2000)
• [Publications] Chu E.,Mizunuma N.et al.: "Thymidylate synthase protein and p53 mRNA form an in vivo ribonucleoprotein complex"Molecular and Cellular Biology. 19・2. 1582-1594 (1999)
• [Publications] Mizumuna N.,Aiba K.et al.: "Intermittent exposure of 5-fluorouracil, on and off schedule, shows high cytotoxicity in a colon cancer cell line"Proc.Am.Ass.Cancer Res.. 40. 399 (1999)
• [Publications] Aiba K.et al.: "An in vitro intermittent exposure to 5-fluorouracil, on and off schedule, shows high cytotoxicity in human colon cell lines"Proc.Am.Ass.Cancer Res.. 39. (1999)
• [Publications] 相羽惠介 他: "5-fluorouracilとLow Dose Cisplatinとの併用療法および新規経口抗癌剤S-1の理論"癌と化学療法. 26・4. 456-466 (1999)
• [Publications] 相羽惠介: "代謝拮抗物質"カレントテラピー. 17・11. 36-46 (1999)