ヒト培養マスト細胞を用いた多価不飽和脂肪酸の抗アレルギー炎症作用に関する検討

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09670838
• Research Institution: Jikei University School of Medicine
• Principal Investigator: 永倉 俊和 東京慈恵会医科大学, 小児科, 助教授 (30125025)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小幡 徹 DNA医学研究所分子細胞生物学, 講師 (80119776)
• Keywords: 培養マスト細胞 / プロスタグランディンD2 / エイコサペンタエン酸 / サイクロオキシケナーゼ2 / サイトカイン

Research Abstract

ヒト臍帯血単核球を、幹細胞因子(Stem Cell Factor,SCE;C-kit リガンド)、IL-6、PGE2、子牛胎児血清で培養し、肥満細胞を誘導する事が可能となった。 この細胞を用いてヒトのアレルギー反応における肥満細胞の役割を解析することを目的とし、ヒト・ミエローマlgE-抗ヒトlgE抗体による実験系を作り、試験管内でヒスタミン・プロスタグランディンD2(PGD2)の産生・遊離をみてきた. 本研究費補助金の援助を受け、多価不飽和脂肪酸(とりわけ栄養食品として注目されるエイコサペンタエン酸[EPA]やジホモリノレン酸[DHA])の肥満細胞に対する作用を解析した結果、培養肥満細胞に取り込まれたEPAやDHAは、ヒスタミンの遊離には影響を与えず、リピッドメディエータであるPGD2産生を抑制し、特にEPA取り込みでは、アレルギー刺激に誘導されて発現しPGD2産生に関わるとされるサイクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)の関与するPGD2産生を効率よく抑制すること、そしてEPAはCOXに代謝されてPGD3になることが、が判った。このことから細胞に取り込まれたEPAはCOX-2が主に分布する細胞内の核周辺の膜構造まで運ばれ、直接アラキドン酸と競合することで、PGD2産生を抑制することが示唆された。これは臨床面で言われるEPAの抗炎症作用の直接の証明となりうると考えられた。
一方、遅発反応における肥満細胞の働きについて検討を行い、実験に用いた培養肥満細胞をlgE-抗lgEで刺激し、6〜8時間後に遊離するサイトカイン類を調べた結果、IL-8及びIL-5について変化が認められたが、IL-4,IL-12,RANTHES,MIP-1αなどは検出できなかった。

Research Products

• [Publications] Obata t,NagaKURA T,et al.: "Eisosapentaenoic acid inhibits PGD2 genereition by inhibiting cox-2 in cultured human mast cells" Clinical&Experimental Allengy. in press.
• [Publications] 永倉俊和,小幡徹 杉本日出雄: "気道アレルギー'98" メディカルレビュー社, 251 (1998)