1998 Fiscal Year Annual Research Report

組換え天疱瘡抗原蛋白を用いたELISA法による病勢モニタリング法の開発

Research Project

Project/Area Number	09670895
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
Keywords	自己免疫性疾患 / 天疱瘡 / ELISA / 診断薬 / 病勢モニタリング / カドヘリン / デスモグレイン / 細胞接着
Research Abstract	本研究の目的は、我々の開発したELISAにより得られる抗体価(ELISAスコア)と病勢との相関関係を検討し、ELISAスコアが病勢をモニターする指標となりうるかを検討することである。前年度の成果をもとに以下のことを明らかにした。病勢を客観的に評価するための基準として、病変部領域の表面積、新生水疱の数、日常生活への支障度などを考慮した基準を設定した。ELISAスコアを簡便化するために、標準陽性血清および標準陰性血清より算出したインデックス値を{(患者血清のOD-陰性コントロールのOD)/(標準血清のOD-陰性コントロールのOD)X100}と設定した。20以上を確実陽性 10-20をグレーゾーン 10以下を陰性とすることで、診断可能であることを確認した。DSg3およびDsg1に対するELISA反応を組み合わせすることにより、従来の蛍光抗体法では困難であった、尋常性天疱瘡と落葉状天疱瘡を血清学的に鑑別することを可能とした。尋常性・落葉状天疱瘡ともに、Dsg3,Dsg1を抗原としたELISA法にて得られる抗体価は、病勢と強い相関性を示し、本ELISA法が病勢のモニタリングとして使用できることが結論された。さらに、Dsg3とDsg1の種々の領域を含むキメラ蛋白をバキュロウイルス発現系にて作製した。それらのキメラ蛋白との競合ELISAを施行したところ、Dsg1、Dsg3ともN末1/3の領域に主要エピトープが存在することを示した。また、少数例においては、細胞外領域中央部1/3の領域にエピトープを有する症例が認められた。これは、天疱瘡抗原における3次元エピトープを初めて明らかにしたことになる。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Amagai M,Nishikawa T,Nousari HC,Anhalt GJ,Hashimoto T: "Antibodies against desmoglein 3(pemphigus vulgaris antigen)are present in sera from patients with paraneoplastic pemphigus and cause acantholysis in vivo in neonatal mice" J Clin Invest. 102. 775-782 (1998)
[Publications] Amagai M,Tsunoda K,Zillikens D,Nagai T,Nishikawa T: "The clinical phenotype of pemphigus is defined by the anti-desmoglein autoantibody profile" J Am Acad Dermatol. 40. 167-170 (1999)
[Publications] Proby C,Fujii Y,Owaribe K,Nishikawa T,Amagai M: "Human autoantibodies against HD1/plectin in paraneoplastic pemphigus" J Invest Dermatol. 112. 153-156 (1999)
[Publications] Lenz P,Amagai M,Volc-Platzer B,Stingl G,Kirnbauer R: "Desmoglein3-ELISA:A pemphigus vulgaris-specific diagnostic tool" Arch Dermatol. 135. 143-148 (1999)
[Publications] Amagai M,Komai A,Hashimoto T,Shirakata Y,Hashimoto K,Yamada T,Kitajima Y,Ohya K,Iwanami H,Nishikawa T: "Usefulness of enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)using recombinant desmogleins 1 and 3 for serodiagnosis of pemphigus" Br J Dermatol. 140. 351-357 (1999)
[Publications] Ishii K,Amagai M,Komai A,Ebihara T,Chorzelski TP,Jablonska S,Ohya K,Nishikawa T,Hashimoto T: "Desmoglein 1 and desmoglein 3 are the target autoantigens in herpetiform pemphigus" Arch Dermatol. (in press). (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

組換え天疱瘡抗原蛋白を用いたELISA法による病勢モニタリング法の開発

Principal Investigator

天谷 雅行 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)

Research Products

[Publications] Amagai M,Nishikawa T,Nousari HC,Anhalt GJ,Hashimoto T: "Antibodies against desmoglein 3(pemphigus vulgaris antigen)are present in sera from patients with paraneoplastic pemphigus and cause acantholysis in vivo in neonatal mice" J Clin Invest. 102. 775-782 (1998)

[Publications] Amagai M,Tsunoda K,Zillikens D,Nagai T,Nishikawa T: "The clinical phenotype of pemphigus is defined by the anti-desmoglein autoantibody profile" J Am Acad Dermatol. 40. 167-170 (1999)

[Publications] Proby C,Fujii Y,Owaribe K,Nishikawa T,Amagai M: "Human autoantibodies against HD1/plectin in paraneoplastic pemphigus" J Invest Dermatol. 112. 153-156 (1999)

[Publications] Lenz P,Amagai M,Volc-Platzer B,Stingl G,Kirnbauer R: "Desmoglein3-ELISA:A pemphigus vulgaris-specific diagnostic tool" Arch Dermatol. 135. 143-148 (1999)

[Publications] Amagai M,Komai A,Hashimoto T,Shirakata Y,Hashimoto K,Yamada T,Kitajima Y,Ohya K,Iwanami H,Nishikawa T: "Usefulness of enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)using recombinant desmogleins 1 and 3 for serodiagnosis of pemphigus" Br J Dermatol. 140. 351-357 (1999)

[Publications] Ishii K,Amagai M,Komai A,Ebihara T,Chorzelski TP,Jablonska S,Ohya K,Nishikawa T,Hashimoto T: "Desmoglein 1 and desmoglein 3 are the target autoantigens in herpetiform pemphigus" Arch Dermatol. (in press). (1999)

天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)